FMO2通过结合CYP2J3减轻心梗后SMAD2/3磷酸化介导的心脏纤维化

发布时间：2023-11-09 19:27

　　研究背景:含黄素单氧化酶2(FMO2)是通过以NADP+和FAD为辅酶和辅基实现异种物质代谢的含黄素单氧化酶(FMO)家族中的一员,且具有不同于家族其他成员的特点,即高表达在与纤维化密切相关的肺,而非在与药物代谢密切相关的肝脏。然FMO2在非代谢领域相关的作用、功能和具体机制e仍有待进一步阐释。在前期实验中,通过对三组SD大鼠(sham组,心梗组,心梗+人经血干细胞移植组)的基因芯片分析及验证,发现FMO2表达在心梗后显著下调,而在经血干细胞移植后心功能改善的同时FMO2表达也明显提高。而在大鼠的心脏组织中,我们发现FMO2于心脏成纤维细胞中的表达远超过其在心肌细胞中的表达。因此,我们推测FMO2可能在心梗后的纤维化过程起重要作用,但具体的作用及机制尚不明确,有待进一步深入研究。研究方法及结果:我们在心梗后的SD大鼠中通过注射过表达FMO2的慢病毒上调FMO2,发现心梗后14和28天的心功能相较于对照组有显著的改善。同时,将病理切片经天狼星红和MASSON染色后结果显示,在FMO2过表达后,大鼠心脏的梗死区域纤维环周长、非梗死区纤维化面积均显著小于对照组,而心梗区段的心肌细胞存活数显著...

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致谢
中文摘要
Abstract
缩略词表
1 引言
2 实验材料
    2.1 实验动物
    2.2 实验仪器
    2.3 实验试剂
3 实验方法
    3.1 细胞及心脏样本的收集
    3.2 Western Blot
    3.3 细胞及细胞培养条件
    3.4 病毒的构建
    3.5 细胞转染
    3.6 组织学分析
    3.7 细胞免疫荧光染色
    3.8 大鼠心脏超声
    3.9 荧光定量PCR
    3.10 蛋白质免疫共沉淀(Co-IP)
    3.11 统计学方法
4 结果
    4.1 FMO2在人,大鼠和小鼠以及食蟹猴心梗后被显著下调
    4.2 FMO2在组织和细胞中的表达差异
    4.3 大鼠心梗后过表达FMO2能显著改善心脏功能
    4.4 大鼠心梗后过表达FMO2能显著减少心梗后的纤维化
    4.5 大鼠心梗后在非心肌细胞中靶向过表达FMO2亦能减轻心梗后的纤维化以及改善心功能
    4.6 大鼠成体干扰FMO2表达能一定程度降低心功能以及增加纤维化
    4.7 FMO2-/-大鼠心功能显著下降,并伴有纤维化增多
    4.8 在FMO2-/-的大鼠中补偿非心肌细胞特异性的FMO2过表达病毒能显著改善FMO2-/-大鼠的心功能
    4.9 体外模型的选择和建立以及依据
    4.10 FMO2过表达能在被TGF-β刺激以后减少NRCF的纤维化基因表达
    4.11 FMO2-/-大鼠的心脏成纤维细胞相对于正常SD大鼠的心脏成纤维细胞具有显著升高的纤维化特性
    4.12 FMO2补偿能减轻心梗病人成纤维细胞的纤维化表象
    4.13 FMO2抑制心脏成纤维细胞转分化以及胶原沉积的机制探讨
    4.14 FMO2通过与CYP2J3的结合来抑制SMAD2/3的磷酸化
    4.15 CYP2J3是FMO2介导的抑制纤维化作用的必须因素
5 讨论
综述
    参考文献
申请者简历



本文编号：3861872