HtrA3在缺氧/复氧诱导的H9C2心肌细胞损伤中的作用及机制研究

发布时间：2024-02-19 19:22

　　背景:冠状动脉粥样硬化性心脏病是心血管疾病的重要组成部分,也是全球范围内的主要死亡原因。缺血/再灌注(I/R)损伤是一直冠心病治疗中的难题,而心肌缺血/再灌注损伤则是由多种机制介导的复杂的过程,其复杂机制目前仍未完全解释清楚。研究表明细胞凋亡、炎症和氧化应激都在心肌缺血/再灌注损伤中起着至关重要的作用。缺血触发心肌细胞炎症,然后通过再灌注扩大和促进心脏死亡,其中单核细胞、白细胞在缺血后不久,就会和其他炎症细胞就会浸润受伤区,活化的巨噬细胞分泌促炎细胞因子,招募中性粒细胞,进一步促进心肌损伤。缺血/再灌注损伤后的炎症反应进一步加重了心肌损害。此外,心肌缺血/再灌注损伤诱导氧自由基的产生,这可能进一步触发细胞炎症和凋亡。由此可见,炎症在缺血/再灌注过程中起着至关重要的作用。高温需求蛋白A3(Htr A3)是Htr A家族的一个组成部分,而Htr A3在炎症中作用的研究目前仍比较少。我们探讨了Htr A3在缺氧后复氧诱导的H9C2心肌细胞中炎症细胞因子的分泌和NF-κB信号通路中的作用,进而初步探究Htr A3在心肌缺血/再灌注损伤中的作用及调节机制,为未来心肌细胞缺血/再灌注损伤炎症反应的...

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

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英文摘要
1 前言
2 实验材料
    2.1 实验细胞
    2.2 主要实验试剂
    2.3 主要实验仪器
    2.4 实验试剂配制
3 实验方法
    3.1 细胞传代培养
    3.2 H9C2心肌细胞模拟缺血/再灌注损伤模型
    3.3 细胞冻存
    3.4 细胞复苏
    3.5 细胞分组
    3.6 质粒提取
    3.7 细胞转染实验
    3.8 蛋白的提取
    3.9 蛋白定量
    3.10 蛋白免疫印迹法(western blot)
    3.11 RNA提取和实时荧光定量法(RT-PCR)
    3.12 LDH活性测定
    3.13 ELISA
    3.14 统计分析
4 实验结果
    4.1 Htr A3在H/R诱导的H9C2 细胞中的表达变化
    4.2 H/R诱导的H9C2细胞中的促炎症细胞因子表达明显升高
    4.3 成功过表达与沉默H9C2 心肌细胞中Htr A3
    4.4 过表达Htr A3 减少H/R诱导的H9C2 细胞中的促炎症细胞因子的表达
    4.5 沉默Htr A3 促进H/R诱导的H9C2 细胞中促炎症细胞因子的表达
    4.6 Htr A3对H/ R诱导的H9C2 细胞中NF-κB信号通路的影响
5 讨论
6 结论
7 参考文献
附录
致谢
综述 micro RNAs 在心肌缺血/再灌注损伤中的研究进展
    参考文献



本文编号：3903197