G蛋白介导apelin亚型与ELABELA对血小板聚集和血栓形成的影响

发布时间：2024-02-20 20:06

　　目的:Apelin是G蛋白偶联受体APJ的内源性配体,前期研究表明,apelin12、17、36及ELABELA浓度依赖性诱导血小板聚集和血栓形成,apelin13则抑制ADP诱导的血小板聚集和血栓形成。本课题进一步阐明不同G蛋白和βarrestin通路介导apelins和ELABELA对血小板聚集和血栓形成的影响。方法:1.应用比浊法检测人、新西兰兔和APLNR^+/-小鼠血小板聚集率变化;2.体外血栓检测仪分析兔体外血栓形成情况;3.Western blot实验比较人血小板中APJ表达差异;4.免疫荧光检测兔血小板上半通道蛋白pannexin 1表达;5.ELISA检测血小板βarrestin变化。结果:1.人血小板上表达APJ受体,高聚集率血小板上APJ受体表达上调;2.Apelin12、17、36和ELABELA诱导人血小板聚集,Apelin13抑制ADP诱导的人血小板聚集;3.敲低APJ受体会减弱apelin对血小板活性的调节作用;4.Gq蛋白抑制剂YM254890抑制apelin12、17、36和ELABELA诱导的兔血小板聚集和体外血栓形成,但不影响a...

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
主要英文缩略语索引
第1章 绪论
    1.1 Apelin/APJ系统
    1.2 血小板激活、血栓形成与抗血栓治疗
    1.3 血小板上的G蛋白信号途径
    1.4 新型pannexin1 抑制剂螺内酯
第2章 实验材料
    2.1 实验对象
    2.2 主要试剂和材料
    2.3 主要仪器
第3章 实验方法
    3.1 血液样本采集
    3.2 血小板聚集实验
    3.3 新西兰兔体外血栓实验
    3.4 洗涤血小板制备及蛋白提取
    3.5 Western blot
    3.6 血小板免疫荧光
    3.7 酶联免疫吸附法
    3.8 统计学方法
第4章 实验结果
    4.1 人血小板上APJ受体表达检测
    4.2 Apelin各亚型和ELABELA对人血小板聚集的影响
        (1)Apelin12、17、36和ELABELA诱导人血小板聚集
        (2)Apelin13 抑制ADP诱导的人血小板聚集
    4.3 敲低APJ受体会减弱apelin对血小板活性的调节作用
    4.4 Gq蛋白抑制剂YM254890对apelin各亚型和ELABELA诱导兔血小板聚集和体外血栓形成的影响
        (1)Gq蛋白抑制剂YM254890 抑制apelin12、17、36 和ELABELA诱导的兔血小板聚集和体外血栓形成
        (2)Gq蛋白抑制剂YM254890 不能拮抗apelin13 抑制ADP诱导的兔血小板聚集和体外血栓形成
    4.5 Gi蛋白抑制剂PTX对 apelin各亚型和ELABELA诱导兔血小板聚集和体外血栓形成的影响
        (1)Gi蛋白抑制剂PTX拮抗apelin13 抑制ADP诱导的兔血小板聚集和体外血栓形成
        (2)Gi蛋白抑制剂PTX不能抑制apelin12、17、36和ELABELA诱导的兔血小板聚集和体外血栓形成
    4.6 磷脂酶C抑制剂U-73122 抑制apelin12、17、36和ELABELA诱导的兔血小板聚集
    4.7 新型pannexin1 抑制剂螺内酯抑制apelin12、17、36 和ELABELA诱导的兔血小板聚集
    4.8 ATP酶 apyrase有效抑制apelin12、17、36和ELABELA诱导的兔血小板聚集
    4.9 Apelin13 诱导兔血小板抑制蛋白βarrestin募集
第5章 讨论
第6章 结论
参考文献
作者攻读学位期间的科研成果
文献翻译
致谢



本文编号：3904467