AIBP调控线粒体自噬对巨噬细胞M1/M2极化及动脉粥样硬化的影响和机制研究

发布时间：2024-03-11 01:46

　　[背景与目的]:动脉粥样硬化(Atherosclerosis,As)是一种慢性炎症病变,血管壁免疫/炎症激活被认为是As发生发展的关键因素之一。作为免疫/炎症系统的主要效应细胞,巨噬细胞聚集在血管壁,吞噬脂质并产生多种炎症因子,从而参与As发生发展的整个过程。因此,深入研究As形成过程中巨噬细胞炎症反应的调控机制对于As性心脑血管疾病的防治具有重要意义。巨噬细胞具有异质性和可塑性,在不同诱导因素刺激下,可形成不同功能的亚群(即巨噬细胞极化),主要分为两大类:经典活化型巨噬细胞(M1型)和替代活化型巨噬细胞(M2型)。M1型巨噬细胞主要由脂多糖(LPS)和干扰素-γ(IFN-γ)诱导,分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)等炎症因子,发挥促炎效应;M2型巨噬细胞主要由IL-4诱导,高表达精氨酸酶1(arginase,Arg1)、IL-10等,发挥抗炎和组织修复效应。在不同发展阶段的As斑块中存在着不同类型的巨噬细胞,M1型巨噬细胞主要存在于斑块的进展期和不稳定性斑块,促进斑块的形成与破裂;M2型主要存在于稳定性斑块,可以缓解斑块形成的炎症环境。载脂蛋白A-I结合蛋...

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图4.1巨噬细胞内AIBP定位情况

.1AIBP在线粒体中的定位首先，我们分离小鼠骨髓源性巨噬细胞并培养THP-1巨噬细胞，通过蛋白免疫印迹显示AIBP在细胞核，细胞质中均表达，但主要表达在线粒体中（如4.1A）。随后进行蛋白酶K保护实验和碱裂解实验，以验证AIBP蛋白在线体中的位置。当用蛋白....

图4.2全长AIBP病毒载体和AIBP线粒体定位序列突变（AIBP-ΔMLS）病毒载体转染AIBP-/-巨噬细胞,蛋白质印记验证AIBP的表达

质免疫印迹结果显示病毒转染的巨噬细胞内AIBP的表达明显高于病毒空载体转染组，而AIBP全长序列转染组线粒体内AIBP水平相对AIBP-ΔMLS转染组显著增加（如图4.2）。图4.2全长AIBP病毒载体和AIBP线粒体定位序列突变（AIBP-ΔMLS）病毒载体转染AI....

图4.3线粒体AIBP对巨噬细胞促炎因子与抗炎因子表达的影响

我们通过qPCR检测AIBP或突变AIBP过表达后，IL-1β，IL-6，TNF-α，IL-18,IL-12，IL-4及IL-10等细胞因子的表达。结果显示线粒体AIBP缺失后，巨噬细胞促炎表达增加，抗炎因子表达减少（如图4.3）。说明线粒体AIBP可能影响巨噬细胞炎症反应。图....

图4.4线粒体AIBP缺失对巨噬细胞M1/M2极化的影响

果显示线粒体AIBP缺失后，M1型巨噬细胞标志物诱导型一氧化氮合酶（iNOS）与环氧化酶（COX2）表达增加，M2型巨噬细胞标志物甘露糖受体（Mrc1）及精氨酸酶（Arg1）表达减少（如图4.4）。说明线粒体AIBP可能通过调控巨噬细胞极化影响炎症反应。图4.4线粒体AIB....

本文编号：3925634