冠心病痰浊瘀阻证患者血清外泌体miR-223-5p介导巨噬细胞凋亡的分子机制

发布时间：2024-03-30 09:19

　　目的:探讨冠心病痰浊瘀阻证与凝血指标和心脏彩超之间的联系,挖掘可能提示该证微观辨证的新型参考指标,从miR-223-5p介导的巨噬细胞凋亡角度探讨冠心病痰浊瘀阻证可能存在的发病机制。材料与方法:比较凝血指标和心脏彩超在冠心病气虚血瘀证、气滞血瘀证与痰浊瘀阻证之间的差异及意义,探讨其与证型的联系。基于miRNA-seq手段比较冠心病气虚血瘀证、痰浊瘀阻证患者和正常人血清外泌体miRNAs分布差异,筛选出有意义的miRNA(即miR-223-5p)。验证冠心病痰浊瘀阻证患者血清外泌体miR-223-5p的表达情况,并检测单个核细胞中其下游靶基因的表达水平。提取冠心病痰浊瘀阻证患者血清外泌体并进行鉴定及定量;体外培养人单核细胞株THP-1细胞,应用PMA(100ng/μl)诱导为巨噬细胞;应用荧光探针标记外泌体,采用活细胞成像技术观察巨噬细胞对患者血清外泌体的摄取情况;并应用实时定量RT-PCR技术检测巨噬细胞在ox-LDL(50μg/ml)环境下摄取患者血清外泌体后,miR-223-5p下游靶基因ALDH2及凋亡基因caspase-3和bcl-2的表达水平,并与正常对照组进行比较分析。结果...

【文章页数】：83 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1Agilent2100RNAPico6000对外泌体miRNAs的检测结果

辽宁中医药大学2020届硕士学位论文-21-实验结果1外泌体miRNA鉴定分析用Agilent2100RNAPico6000对提取的miRNAs进行检测，结果显示，提取miRNAs的片段>90%集中在100bp以下，质控合格（图1）。图1Agilent2100RNAPico600....

图2各样本已知miRNA比对结果

辽宁中医药大学2020届硕士学位论文-21-实验结果1外泌体miRNA鉴定分析用Agilent2100RNAPico6000对提取的miRNAs进行检测，结果显示，提取miRNAs的片段>90%集中在100bp以下，质控合格（图1）。图1Agilent2100RNAPico600....

图3各样本已知miRNA分布聚类热图

痰浊瘀阻型冠心病患者血清外泌体miR-223-5p介导巨噬细胞凋亡的分子机制-22-图3各样本已知miRNA分布聚类热图注：图中各列代表不同的样品，各行代表不同的基因，相应的颜色代表该基因在样品中表达量的高低。红色表示基因在样品中表达量高，绿色表示基因在样品中表达量低，N表示为正....

图4已知miRNA表达差异分析

辽宁中医药大学2020届硕士学位论文-23-图4已知miRNA表达差异分析注：T表示为痰浊淤阻组、Q为气虚血瘀组、Z为正常组，纵坐标pvalue表示为两组比较的差异显著性4miR-223-5p与冠心病的调控关系登录DisGeNET数据库，在‘Downloads’目录下选择‘Gen....

本文编号：3942146