miR-133a介导Bcl-xl表达调节内皮细胞的凋亡

发布时间：2024-03-31 12:21

　　目的 microRNA-133a(miR-133a)参与动脉粥样硬化(AS)病理过程的具体机制不详。文中旨在探究miR-133a参与内皮细胞凋亡的调控过程。方法培养人冠状内皮细胞(HCAECs),分别给予不同浓度(5、15、25、50、75μg/mL)的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)处理12、24 h, MTT法检测细胞活力,筛选文献证实靶向调节抗凋亡蛋白B淋巴细胞瘤因子2-特大型(Bcl-xl)的miRNA。转染细胞48 h后分为:无义序列组(无义序列NC)、过表达组(过表达miR-133a mimics)、沉默无义序列+诱导组(沉默无义序列in NC+ox-LDL诱导HCAECs)、miRNA沉默+诱导组(miR-133a敲减inhibitor+ox-LDL诱导HCAECs)。Western blot法检测抗凋亡蛋白Bcl-xl及活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase3)表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率。采用瞬时转染技术过表达及沉默miR-133a,观察其对靶基因Bcl-xl蛋白表达及内皮细胞凋亡的影响。结果 MTT法检测显示,ox-LDL浓度25、50μg...

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【文章目录】：
0 引 言
1 材料与方法
    1.1 主要材料
    1.2 细胞培养
    1.3 细胞处理
    1.4 细胞活力检测
    1.5 miRNA筛选
    1.6 细胞转染
    1.7 细胞凋亡检测
    1.8 qRT-PCR检测
    1.9 Western blot分析
    1.10 统计学分析
2 结 果
    2.1 MTT法检测细胞活力
    2.2 qRT-PCR结果
    2.3 流式细胞仪检测细胞凋亡率
    2.4 Bcl-xl及cleaved-caspase3蛋白表达
3 讨 论



本文编号：3943926