MicroRNA-19b/221/222通过靶向调控PGC1α的表达而介导内皮功能紊乱的研究

发布时间：2024-04-25 19:47

　　PGC1α(Peroxisome proliferator-activated receptory coactivator (PGC)-1α)是一类转录共激活因子,主要分布在机体能量代谢旺盛的组织或器官,如：骨骼肌、棕色脂肪、心脏、肾以及脑等,它和机体的能量代谢密切联系。PGC1α通过与各种转录因子的协同作用调控机体的一系列生理病理活动,包括肌肉萎缩、心衰以及动脉粥样硬化。然而PGC1α在动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)的发生过程中机制并不是特别清楚。之前我们的研究显示,PGC1α能够抑制病理条件下血管平滑肌(Vascular smooth muscle cell, VSMC)的增殖和迁移,例如在VSMC中过表达PGC1P能够抑制高糖高脂或者PDGF-BB诱导的增值迁移,而地塞米松则能够通过上调VSMC中的PGC1α含量延缓动脉粥样硬化的发生发展,说明PGC1α可能具有抗动脉粥样硬化的作用。本次研究我们发现动脉粥样硬化血管与正常血管相比,其中PGC1α蛋白水平显著降低,而其mRNA水平则明显升高；表明在AS过程中,PGC1α蛋白的表达受到了转录后调控。利用芯片技术...

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
    1.1 动脉粥样硬化
    1.2 PGC1-α
        1.2.1 PGC1α的结构以及参与mRNA加工的过程
        1.2.2 PGC1α的生理功能
        1.2.3 PGC1α和心血管系统
    1.3 miRNA的发现及其生物学功能
        1.3.1 miRNA的产生及作用机制
        1.3.2 miRNA与心血管疾病
第二章 实验材料和方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 动脉粥样硬化样本收集
        2.1.2 实验细胞
        2.1.3 主要实验试剂
        2.1.4 实验仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 HAEC细胞培养
        2.2.2 细胞转染
        2.2.3 TNF-α以及IFN-γ刺激细胞
        2.2.4 Luciferase质粒的构建以及荧光素酶活性检验
        2.2.5 Western Blotting
        2.2.6 miR-19b/221/222原位杂交
        2.2.7 CD31免疫荧光
        2.2.8 ROS检测
        2.2.9 TUNEL
        2.2.10 AnnexinV/PI双染凋亡检测
第三章 结果和分析
    3.1 AS患者血管与正常血管中PGC1αmRNA及蛋白表达差异
    3.2 靶向调控PGC1α的miRNAs筛选
    3.3 miR-19b-3p,miR-221-3p以及miR-222-3p直接靶向调控PGC1α
    3.4 miR-19b/221/222在AS血管中的定位
    3.5 miR-19b/221/222调控HAEC中PG1α蛋白表达以及细胞内线粒体数量
    3.6 miR-19b/221/222诱导细胞内ROS的产生以及细胞凋亡
第四章 讨论与展望
致谢
攻读硕士期间参与发表的论文
参考文献



本文编号：3964171