Profilin-1靶向的多模态纳米探针对动脉粥样硬化斑块的分子影像研究
发布时间：2024-06-23 10:59
研究背景： 随着人类生活水平和饮食习惯的改变，心血管疾病已成为威胁人类健康的重大疾病之一，具有高发病率和高致死率的特点。据不完全统计，全球2008年心血管疾病的死亡率占所有致死因素的30%左右。世界卫生组织预测，到2020年心血管疾病将成为全世界的第一死因。而大量的研究证明，动脉粥样硬化易损斑块所导致的斑块破裂、血栓形成和血管阻塞是引起急性心血管事件的主要因素。虽然随着研究的不断深入，动脉粥样硬化斑块的预防和治疗已形成很多的共识，包括生活方式的干预、药物治疗、介入治疗和外科手术治疗等。但是由于易损斑块具有隐匿性和破裂的突发性等特点，其所导致的急性临床事件仍然居高不下。因此，如何实现对易损斑块形态和成分性质的早期诊断，并进行积极有效的干预是心血管研究领域亟待解决的关键科学问题。 近年来蓬勃发展的分子影像技术，区别与传统的影像技术，它能够从组织和细胞水平反映疾病的病理形成过程，为实时动态观察动脉粥样硬化斑块的结构和成分变化提供了有效的工具，同时还可以用于判断预防和治疗的效果。特异性的分子成像探针的构建和制备对于疾病的分子影像诊断至关重要，是提高成像的特异性和敏感度的关键环节。而合成分子探针...
【文章页数】：98 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
缩略语表
中文摘要
Abstract
前言
文献回顾
1.心血管疾病的流行病学、治疗现状以及面临的问题
2.分子影像学在动脉粥样硬化中的应用
3.Profilin-1与心血管疾病
4.纳米颗粒与分子影像
第一部分 Profilin-1 在动脉粥样硬化进展中的作用及机制研究
1 材料
1.1 实验动物
1.2 试剂和材料
1.3 仪器和设备
2 方法
2.1 动脉粥样硬化(Atherosclerosis, AS)小鼠模型的构建和验证
2.2 实验分组
2.3 甘油三酯 (TG) 水平检测
2.4 血浆高密度脂蛋白(LDL-C)水平检测
2.5 血浆高密度脂蛋白(HDL-C)水平检测：
2.6 血管大体标本油红染色
2.7 血管组织 HE 染色和油红染色
2.8 血管组织免疫荧光染色
2.9 Western blot 法检测血管壁组织中 profilin-1 等蛋白的表达水平
2.10 小鼠胸主动脉平滑肌细胞系(MOVAS)的培养和鉴定
2.11 Profilin-1 siRNA 重组质粒的构建
2.12 细胞实验分组
2.13 CCK-8 细胞增殖实验
2.14 Transwell 细胞迁移实验
2.15 统计学处理
3 结果
3.1 各组小鼠血脂水平的比较：
3.2 Atorvastatin 治疗可减小斑块的面积
3.3 Profilin-1 蛋白的表达水平与斑块的负荷相关
3.4 血管平滑肌细胞的形态学观察和鉴定
3.5 Ox-LDL 预处理促进 VSMCs 胞内 profilin-1 的表达
3.6 Realtime PCR 筛选出干扰效果最佳的 Profilin-1 siRNA
3.7 ox-LDL 预处理促进 VSMCs 的增殖和迁移
3.8 ox-LDL 激活 VSMCs 的 Profilin-1/MEK/ERK 信号通路
4 讨论
第二部分 靶向 profilin-1 多模态纳米探针的构建和表征
1 材料
1.1 试剂和材料
1.2 仪器和设备
2 方法
2.1 DMSA-Fe3O4纳米颗粒的制备
2.2 DMSA-Fe3O4纳米颗粒的表征
2.3 DMSA-Fe3O4纳米颗粒生物学特性检测
2.4 多模态 PF1-DMSA-Fe3O4纳米探针的合成
2.5 多模态 PF1-DMSA-Fe3O-4纳米探针偶联效率检测
2.6 多模态 PF1-DMSA-Fe3O4纳米探针在体内器官的生物学分布
2.7 统计学处理
结果
3.1 DMSA-Fe3O4 纳米颗粒的表征
3.2 DMSA-Fe3O4 纳米颗粒的稳定性和生物相容性
3.3 Profilin-1 与 DMSA-Fe3O4 纳米颗粒的偶联效率
3.4 PF1-Cy5.5- DMSA-Fe3O4 纳米探针在体内的各主要器官代谢
4 讨论
第三部分 profilin-1多模态纳米探针对小鼠动脉粥样硬化斑块进展的在体分子成像
1 材料
1.1 实验动物
1.2 试剂和材料
1.3 仪器和设备
2 方法
2.1 实验方案
2.2 MOVAS 细胞与探针体外结合实验
2.3 不同浓度探针与相应 MRI 1/T2值的相关关系
2.4 PF1-Cy5.5- DMSA-Fe3O4-NP 探针对小鼠动脉粥样硬化斑块的磁共振成像
2.5 图像处理和数据采集
2.6 血管组织普鲁士蓝染色
2.7 数据的统计学分析
3 结果
3.1 PF1-Cy5.5- DMSA-Fe3O4-NP 探针能够特异性的与 MOVAS 细胞结合
3.2 不同浓度探针与相应 1/T2值的相关关系
3.3 小鼠颈动脉斑块 MRI T2成像
3.4 小鼠颈动脉斑块普鲁士蓝染色
3.5 小鼠颈动脉斑块荧光成像
4 讨论
小结
参考文献
个人简历和研究成果
致谢
本文编号：3995365
【文章页数】：98 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
缩略语表
中文摘要
Abstract
前言
文献回顾
1.心血管疾病的流行病学、治疗现状以及面临的问题
2.分子影像学在动脉粥样硬化中的应用
3.Profilin-1与心血管疾病
4.纳米颗粒与分子影像
第一部分 Profilin-1 在动脉粥样硬化进展中的作用及机制研究
1 材料
1.1 实验动物
1.2 试剂和材料
1.3 仪器和设备
2 方法
2.1 动脉粥样硬化(Atherosclerosis, AS)小鼠模型的构建和验证
2.2 实验分组
2.3 甘油三酯 (TG) 水平检测
2.4 血浆高密度脂蛋白(LDL-C)水平检测
2.5 血浆高密度脂蛋白(HDL-C)水平检测：
2.6 血管大体标本油红染色
2.7 血管组织 HE 染色和油红染色
2.8 血管组织免疫荧光染色
2.9 Western blot 法检测血管壁组织中 profilin-1 等蛋白的表达水平
2.10 小鼠胸主动脉平滑肌细胞系(MOVAS)的培养和鉴定
2.11 Profilin-1 siRNA 重组质粒的构建
2.12 细胞实验分组
2.13 CCK-8 细胞增殖实验
2.14 Transwell 细胞迁移实验
2.15 统计学处理
3 结果
3.1 各组小鼠血脂水平的比较：
3.2 Atorvastatin 治疗可减小斑块的面积
3.3 Profilin-1 蛋白的表达水平与斑块的负荷相关
3.4 血管平滑肌细胞的形态学观察和鉴定
3.5 Ox-LDL 预处理促进 VSMCs 胞内 profilin-1 的表达
3.6 Realtime PCR 筛选出干扰效果最佳的 Profilin-1 siRNA
3.7 ox-LDL 预处理促进 VSMCs 的增殖和迁移
3.8 ox-LDL 激活 VSMCs 的 Profilin-1/MEK/ERK 信号通路
4 讨论
第二部分 靶向 profilin-1 多模态纳米探针的构建和表征
1 材料
1.1 试剂和材料
1.2 仪器和设备
2 方法
2.1 DMSA-Fe3O4纳米颗粒的制备
2.2 DMSA-Fe3O4纳米颗粒的表征
2.3 DMSA-Fe3O4纳米颗粒生物学特性检测
2.4 多模态 PF1-DMSA-Fe3O4纳米探针的合成
2.5 多模态 PF1-DMSA-Fe3O-4纳米探针偶联效率检测
2.6 多模态 PF1-DMSA-Fe3O4纳米探针在体内器官的生物学分布
2.7 统计学处理
结果
3.1 DMSA-Fe3O4 纳米颗粒的表征
3.2 DMSA-Fe3O4 纳米颗粒的稳定性和生物相容性
3.3 Profilin-1 与 DMSA-Fe3O4 纳米颗粒的偶联效率
3.4 PF1-Cy5.5- DMSA-Fe3O4 纳米探针在体内的各主要器官代谢
4 讨论
第三部分 profilin-1多模态纳米探针对小鼠动脉粥样硬化斑块进展的在体分子成像
1 材料
1.1 实验动物
1.2 试剂和材料
1.3 仪器和设备
2 方法
2.1 实验方案
2.2 MOVAS 细胞与探针体外结合实验
2.3 不同浓度探针与相应 MRI 1/T2值的相关关系
2.4 PF1-Cy5.5- DMSA-Fe3O4-NP 探针对小鼠动脉粥样硬化斑块的磁共振成像
2.5 图像处理和数据采集
2.6 血管组织普鲁士蓝染色
2.7 数据的统计学分析
3 结果
3.1 PF1-Cy5.5- DMSA-Fe3O4-NP 探针能够特异性的与 MOVAS 细胞结合
3.2 不同浓度探针与相应 1/T2值的相关关系
3.3 小鼠颈动脉斑块 MRI T2成像
3.4 小鼠颈动脉斑块普鲁士蓝染色
3.5 小鼠颈动脉斑块荧光成像
4 讨论
小结
参考文献
个人简历和研究成果
致谢
本文编号：3995365
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/xxg/3995365.html
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