心包腔内移植高活性心肌球治疗大鼠急性心肌梗死

发布时间：2024-07-07 00:50

　　目的:通过体外预刺激方法制备高干细胞活性与旁分泌功能的心肌球(cardiospheres,CSps)作为移植干细胞,在大鼠急性心肌梗死模型中建立心包腔内移植治疗途径,探究CSps移植后的疗效与相关再生机制。方法:从大鼠心脏分离培养CSps,免疫荧光鉴定心脏干细胞标记物的表达情况;使用不同浓度心肌梗死后心包积液(Pericardial fluid with myocardial infarction,PFMI)培养CSps,q PCR检测干细胞标记物(c-kit、Sca-1和KDR)、心肌细胞标记物(c Tn T)与生长因子(VEGF、b FGF、HGF和IGF-1)转录水平;与磷酸盐缓冲液对比,使用基质水凝胶混悬CSps置于4℃条件下,检测两者对细胞活性的影响;结扎冠状动脉左前降支制备急性心肌梗死模型,将Di R标记的CSps—基质水凝胶悬液注入大鼠心包腔,观察心梗4周内心功能与形态学变化,分析CSps体内存活,治疗效果及其治疗机制。结果:体外培养获得球状生长的CSps,使用50%心包积液预处理促进了CSps中干性基因(c-kit、Sca-1和KDR)、心肌细胞c Tn T和生长因子(...

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1CSps的体外培养

1CSps的体外培养。A，P2代CSps体外培养形态；B，不同代数形成CSpsn=10皿/代）；C，免疫荧光检测c-kit，Sca-1和KDR在CSps中的表达情况（n实时荧光定量PCR检测不同培养代数生长因子（VEGF,bFGF,HGF和....

图2不同浓度心包腔积液培养液对CSps的刺激作用

暨南大学硕士学位论文中干性基因表达水平，且50%和100%的心包腔积液对干性基因的提高作用显著强于25%的心包腔积液的作用。分析心包腔积液对CSps中心肌细胞cTnT基因表达水平的影响，结果如图2C所示，所有浓度的心包腔积液均可显著提高cTnT的基因表达水平，且....

图3CSps-基质水凝胶混悬液对CSps的保护作用

基质水凝胶对CSps具有保护作用流式细胞仪检测使用PBS和基质水凝胶与CSps混悬，置于4℃下1h、6h胞凋亡情况，结果如图3。对照组用PBS与CSps混悬，置于4℃下1h细胞凋亡，并随着放置时间的延长，凋亡细胞的数量逐渐增多，良好状例分别为86....

图4急性心梗模型制备示意图

暨南大学硕士学位论文质水凝胶混悬液移植CSps于培养皿中，加入3.5μg/mlDiR于37℃孵育30min，并转移至15ml离心管中离心去除PBS，加入0.1ml基质水至1.5mlEP管中，4℃条件下运输到动物房。CSps组进行L留置针注射CSp....

本文编号：4002897