心肌营养因子-1化学发光免疫定量检测方法学建立及其在心力衰竭诊断中价值研究

发布时间：2025-01-15 19:37

　　研究背景:心力衰竭(HF)几乎是所有心脏疾病的终末阶段,其发病率、死亡率逐年攀升,给人类造成了极大的经济负担和生活压力,因此及时准确识别慢性心力衰竭患者是至关重要的。心肌营养因子-1(CT-1)是白细胞介素-6超家族的成员,是一种可以引起心肌细胞肥大和功能障碍的细胞因子,大量研究表明血浆CT-1可作为心力衰竭诊断、分期和预后评估的心脏生物标志物。然而,目前仍然缺乏较为高效的检测方法,难以实现对CT-1的快速、简易定量检测,极大的限制了心肌营养因子-1作为诊断标志物的临床研究进程。方法:本研究建立了一种基于微米磁颗粒及生物素-亲和素系统的CT-1化学发光免疫定量检测方法(MPs-CLIA),能够快速、灵敏检测血浆CT-1的含量。1.血浆心肌营养因子-1化学发光免疫定量检测方法学的建立及优化:制备生物素标记兔抗人CT-1多克隆抗体(bio-Ab)及吖啶酯标记兔抗人CT-1多克隆抗体(AE-Ab)。对血浆心肌营养因子-1化学发光免疫定量检测方法学进行优化:优化生物素标记抗人游离CT-1多克隆抗体(bio-Ab)及吖啶酯标记抗人游离CT-1多克隆抗体(AE-Ab)的浓度。优化抗原抗体反应时间、免...

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图3-1AE-anti-CT-1检测抗体和bio-anti-CT-1捕获抗体浓度与RLU关系

浙江大学硕士学位论文正文结果与讨论163结果与讨论3.1MPs-CLIA实验条件的优化3.1.1AE-anti-CT-1检测抗体和bio-anti-CT-1捕获抗体浓度的优化我们制备一系列抗体对的浓度梯度，分别为0.1μg/ml、0.2μg/ml、0.4μg/ml、0.8μg/m....

图3-2MPs-SA浓度与RLU关系

浙江大学硕士学位论文正文结果与讨论173.1.2确定亲和素包被磁珠（MPs-SA）浓度本研究分别选取0.14μg/μL,0.28μg/μL,0.43μg/μL,0.72μg/μLand0.86μg/μL磁珠浓度进行优化。经过实验，图3-2所示，磁珠浓度为0.72μg/μL，50μ....

图3-3免疫孵育时间与RLU的关系

浙江大学硕士学位论文正文结果与讨论18图3-3免疫孵育时间与RLU的关系3.1.4MPs-SA捕获时间的优化MPs-SA的捕获时间也对抗原抗体反应起到一定影响。本研究选取5分钟、10分钟、15分钟、30分钟、45分钟、60分钟进行优化。图3-4所示，加磁珠后，孵育15min，信号....

图3-4MPs-SA捕获时间与RLU的关系

浙江大学硕士学位论文正文结果与讨论18图3-3免疫孵育时间与RLU的关系3.1.4MPs-SA捕获时间的优化MPs-SA的捕获时间也对抗原抗体反应起到一定影响。本研究选取5分钟、10分钟、15分钟、30分钟、45分钟、60分钟进行优化。图3-4所示，加磁珠后，孵育15min，信号....

本文编号：4027758