MiR-150对内皮祖细胞促深静脉血栓溶解再通作用的研究

发布时间：2025-02-09 17:50

　　深静脉血栓形成(Deep venous thrombosis DVT)是常见的外周血管疾病，可导致肢体肿胀、下肢缺血、血栓后综合症，甚至致死性肺栓塞的发生。现在对于DVT的治疗主要是各种抗凝溶栓药物的使用，但效果并不令人满意，同时抗凝药物的副作用可导致机体凝血功能下降、消化道出血、手术患者切口并发症发生。 研究人员发现骨髓来源的内皮祖细胞(Bone marrow-derived endothelialprogenitor cells BMEPCs)可以分化为血管内皮细胞，分泌各种促血管生成因子从而促进缺血组织的血管新生。研究证实，EPCs可以归巢到深静脉血栓中促进血栓机化再通。我们实验组前期的研究也发现移植EPCs后可以改善血栓内的微环境，促进急性静脉血栓溶解及慢性血栓再通。但是由于EPCs增殖能力及迁移归巢能力较弱，EPCs的应用受到很大的限制。如何更好的改善EPCs的功能成为广大学者的研究方向。 MicroRNAs(miRNAs)是一类小分子非编码RNAs，可在转录后水平调控基因表达。研究证明MicroRNAs在血管新生过程中扮演了重要角色。miR-150最初被发现于免疫...

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图2EPCs原代培养生长曲线

心分离单个核细胞，离心后可见细胞分为四层，箭头表测长曲线略呈“S”形，细胞培养早期增殖较慢，在培养的细胞处于对数增长期，13天后细胞增殖进入平台期（

图3：细胞培养形态学观察A刚分离的骨髓单个核细胞较小，呈圆形，悬浮于培养基中(×100)；B培养24小时后，可见少量细胞贴壁，细胞形态呈椭圆形、不规则形或短棒状(×100)；C培养2-3天后贴壁细胞增多，细胞形态逐渐变大，可见细胞集

养至第12～14天，细胞长满培养瓶底，主要呈现典型铺路鹅卵石样外观。此后细胞具有较高的增殖活性，培养细胞的形态和生长特点经多次传代后仍保持无明显变化。我们选取P2-P3代细胞作为研究对象（图3）。图3：细胞培养形态学观察A刚分离的骨髓单个核细胞较小，呈圆形，悬浮于培养基中(×1....

图4:免疫组化示P2-P3代EPCs阳性表达VEGFR-2及vWF

选取P2-P3代骨髓单个核细胞，采用免疫组化，免疫荧光方法检测细胞表面标记。培养细胞免疫组化，免疫荧光结果显示，绝大多数细胞表达内皮表面标记物VEGFR-2及vWF（图4、图5）；以上结果提示P2-P3代骨髓单个核细胞经诱导分化后，呈现late-EPCs表型。图4:免疫组化示....

图5：免疫荧光示P2-P3代EPCs阳性表达vWF

选取P2-P3代骨髓单个核细胞，采用免疫组化，免疫荧光方法检测细胞表面标记。培养细胞免疫组化，免疫荧光结果显示，绝大多数细胞表达内皮表面标记物VEGFR-2及vWF（图4、图5）；以上结果提示P2-P3代骨髓单个核细胞经诱导分化后，呈现late-EPCs表型。图4:免疫组化示....

本文编号：4032634