不同端粒片段通过沉默信息调节因子1/抑癌基因P53促进血管平滑肌细胞凋亡

发布时间：2025-02-10 20:52

　　 目的:研究不同端粒寡核苷酸序列对大鼠胸大动脉平滑肌细胞(A7R5)凋亡的影响,及沉默信息调节因子1(SIRT1)/抑癌基因P53(P53)信号通路是否参与调控端粒寡核苷酸序列诱导A7R5的凋亡。方法:将三种端粒重复序列端粒寡核苷酸序列的二聚体、四聚体、六聚体[TE-12(TTAGGG)2、TE-24(TTAGGG)4、TE-36(TTAGGG)6]转染至A7R5,分别作为TE-12组、TE-24组、TE-36组,另设A7R5空白为阴性对照组。应用流式细胞仪检测各端粒寡核苷酸序列转染后A7R5的凋亡情况。采用逆转录多聚酶联反应(RT-PCR)及蛋白免疫印迹(Western-blot)检测TE-12组、TE-24组、TE-36组及阴性对照组SIRT1、P53基因及蛋白水平。结果:将TE-12、TE-24、TE-36成功转染进A7R5,各组转染率差异无统计学意义。TE-12组A7R5凋亡率明显高于TE-36组、TE-24组和阴性对照组,TE-24组细胞凋亡率最低,但亦明显高于阴性对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。TE-12组A7R5SIRT1m RNA及蛋白水平明显高于TE...

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【部分图文】：

图1荧光显微镜下显示大鼠胸大动脉平滑肌细胞对荧光标记的寡核苷酸序列的摄取结果

中进行压片、洗片。1.6统计学分析应用SPSS17.0软件对数据进行统计学分析。各组数据均符合正态性，计量资料以±s表示。符合方差齐性检验数据，采用单因素方差分析。方差不齐数据，则采用两独立样本秩和检验（Mann-WhitneyU）进行分析。以P<0.05为差异有统计学意义。2结....

图3各组转染后大鼠胸大动脉平滑肌细胞SIRT1蛋白水平的蛋白免疫印迹检测结果

中国循环杂志2017年6月第32卷第6期（总第228期）ChineseCirculationJournal，June，2017，Vol.32No.6（SerialNo.228）6152.4各组A7R5SIRT1蛋白及P53蛋白水平检测结果各组A7R5SIRT1蛋白水平比较：TE-....

图4各组转染后大鼠胸大动脉平滑肌细胞P53蛋白水平的蛋白免疫印迹检测结果

动脉平滑肌细胞凋亡率流式细胞仪检测结果SIRT1β-Actin阴性对照组TE-12组TE-24组TE-36组注：TE-12：端粒寡核苷酸序列的二聚体形式；TE-24：端粒寡核苷酸序列的四聚体形式；TE-36：端粒寡核苷酸序列的六聚体形式；SIRT1：沉默信息调节因子1；β-Act....

图2各组转染后大鼠胸大动脉平滑肌细胞凋亡率流式细胞仪检测结果

组A7R5SIRT1蛋白及P53蛋白水平检测结果各组A7R5SIRT1蛋白水平比较：TE-12组、TE-24组、TE-36组及阴性对照组A7R5SIRT1蛋白相对表达量分别为1.92±0.01、1.51±0.02、1.61±0.01、0.50±0.01。TE-12组A7R5SIR....

本文编号：4033065