CYP4A11代谢生成的20-HETE对小鼠血压的影响及其血管张力的调控

发布时间：2017-06-08 18:14

  本文关键词：CYP4A11代谢生成的20-HETE对小鼠血压的影响及其血管张力的调控，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：细胞色素P450 4A11(Cytochrome P450 4A11,CYP4A11),主要在人体肝脏和肾脏表达,通过羟化作用将花生四烯酸(arachidonicacid,AA)代谢为20-羟基二十碳四烯(20-hydroxyeicosatetraenoic acid,20-HETE)。CYP4A11是代谢生成20-HETE最重要的酶之一,20-HETE作用在体内不同的部位和位点,起到升血压和抗高血压的作用从而参与高血压的发生发展。CYP4A11羟基化AA生成20-HETE,20-HETE参与到血压的调控,其中涉及到多个代谢通路,极其复杂,但其具体的作用机制并不清楚。为了研究CYP4A11代谢生成的20-HETE与小鼠血压之间的关系,本研究首先通过高盐高脂饲料饲养建立野生型(WT)雄性C57BL/6J小鼠和雄性eNOS小鼠高血压模型,并给予CYP4A11的酶活性抑制剂HET0016,测定模型小鼠的血压变化及血清、尿液中的20-HETE的含量,初步研究20-HETE及HET0016与雄性C57BL/6J小鼠和雄性eNOS小鼠血压之间的关系;然后通过构建与人体CYP4A11同源的Cyp4a10过表达的慢病毒,通过尾静脉注射转染到WT雄性C57BL/6J小鼠和雄性eNOS小鼠构建Cyp4a10过表达小鼠模型,测定转染后小鼠血压变化及血清、尿液中20-HETE含量,研究Cyp4a10代谢生成20-HETE对小鼠血压的影响,初步研究Cyp4a10、20-HETE及HET0016与雄性C57BL/6J小鼠和雄性eNOS小鼠血压之间的关系;为研究Cyp4a10代谢生成20-HETE及抑制剂HET0016对小鼠血管张力的调控,通过测定20-HETE和HET0016对小鼠的肾内动脉和主动脉张力的影响,研究20-HETE及HET0016血管张力的作用并初步探讨其作用机制。本研究通过高盐高脂饲料喂养和慢病毒转染的方式,构建了不同类型的高血压小鼠模型,并通过测定小鼠的肾内动脉和主动脉的张力,从器官水平和整体水平研究CYP4A11代谢生成的20-HETE对小鼠血压的影响,初步明确了CYP4A11代谢生成20-HETE对小鼠血压的调节作用,证明了在小鼠体内20-HETE的升血压作用和HET0016的抗高血压作用,并对20-HETE及HET0016对血管张力的调节机制做了初步研究。本次研究为进一步探索CYP4A11和20-HETE对高血压的调节作用打下了基础,能够成为分析CYP4A11及其代谢产物20-HETE对血压的调节作用及机制的重要手段。
【关键词】：CYP4A11 20-HETE 小鼠 高血压 张力
【学位授予单位】：华南理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R544.1
【目录】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-10
• 英文缩略词表10-13
• 第一章 绪论13-22
• 1.1 CYP及CYP4A11基本概述13-14
• 1.2 CYP4A11多态性与高血压相关性研究14-15
• 1.3 AA及其代谢产物 20-HETE概述15-17
• 1.3.1 AA及其代谢途径概述15-16
• 1.3.2 20-HETE及其功能概述16-17
• 1.4 高血压及其研究方法概述17-20
• 1.4.1 高血压简介17-18
• 1.4.2CYP4s相关高血压动物模型18-19
• 1.4.3 离体血管张力测定在高血压研究中的应用19-20
• 1.5 本课题的研究意义和主要内容20-22
• 1.5.1 本课题的研究意义20-21
• 1.5.2 本课题的主要内容21-22
• 第二章 高血压小鼠模型的构建与研究22-64
• 2.1 前言22
• 2.2 实验材料22-27
• 2.2.1 实验对象22
• 2.2.2 主要实验仪器和耗材22-23
• 2.2.3 细胞、菌株和质粒23-25
• 2.2.4 主要试剂25-26
• 2.2.5 溶液和培养基26-27
• 2.3 实验一：饮食诱导构建高血压小鼠模型与研究27-30
• 2.3.1 小鼠饲养方法27
• 2.3.2 小鼠分组27-28
• 2.3.3 小鼠血压的测定28
• 2.3.4 HET0016对小鼠血压的影响研究28-29
• 2.3.5 小鼠血清和尿液 20-HETE含量测定29-30
• 2.4 实验二：过表达Cyp4a10小鼠的构建与研究30-45
• 2.4.1 重组质粒的构建30-39
• 2.4.2 过表达Cyp4a10慢病毒的包装39-43
• 2.4.3 慢病毒转染小鼠43-44
• 2.4.4 HET0016对小鼠血压的影响研究44
• 2.4.5 小鼠血清和尿液 20-HETE含量测定44
• 2.4.6 活体荧光检测慢病毒表达44
• 2.4.7 离体小鼠器官荧光检测慢病毒表达44-45
• 2.5 结果与分析45-62
• 2.5.1 实验一：饮食诱导构建高血压小鼠模型与研究45-48
• 3.5.1.1 饮食诱导构建高血压小鼠模型45-46
• 2.5.1.2 HET0016对小鼠血压的影响46-47
• 2.5.1.3 小鼠血清和尿液 20-HETE含量测定47-48
• 2.5.2 实验二：过表达Cyp4a10小鼠的构建与研究48-62
• 2.5.2.1 重组质粒的构建48-53
• 2.5.2.2 过表达Cyp4a10慢病毒的包装53-56
• 2.5.2.3 转染慢病毒后小鼠血压的变化56-57
• 2.5.2.4 活体荧光检测慢病毒表达57-58
• 2.5.2.5 离体器官检测慢病毒表达58-59
• 2.5.2.6 HET0016对小鼠血压的影响59-60
• 2.5.2.7 小鼠血清和尿液 20-HETE含量测定60-62
• 2.6 讨论62-64
• 第三章 20-HETE及其抑制剂HET0016对离体小鼠血管张力的影响64-77
• 3.1 前言64
• 3.2 实验材料64-65
• 3.2.1 实验药物64
• 3.2.2 实验仪器与耗材64
• 3.2.3 实验动物64-65
• 3.2.4 实验溶液65
• 3.3 实验一：小鼠离体肾内动脉血管张力测定实验65-68
• 3.3.1 小鼠肾内动脉的分离65
• 3.3.2 肾内动脉环的固定与平衡65-66
• 3.3.3 小鼠离体肾内动脉环的功能性检测66-67
• 3.3.4 HET0016对离体小鼠肾内动脉张力的影响67-68
• 3.4 实验二：小鼠离体主动脉血管张力测定实验68-69
• 3.4.1 小鼠主动脉的分离68
• 3.4.2 主动脉环的固定与平衡68
• 3.4.3 小鼠离体主动脉环的功能性检测68-69
• 3.4.4 HET0016对离体小鼠主动脉张力的影响69
• 3.4.5 20-HETE对离体小鼠主动脉张力的影响69
• 3.5 结果与分析69-75
• 3.5.1 HET0016对高钾预收缩的离体小鼠肾内动脉张力的影响69-70
• 3.5.2 HET0016对Phe预收缩的离体小鼠肾内动脉张力的影响70-71
• 3.5.3 HET0016对高钾预收缩的离体小鼠主动脉张力的影响71-72
• 3.5.4 Phe对不同小鼠离体主动脉张力的影响72
• 3.5.5 HET0016对Phe预收缩不同小鼠的主动脉张力的影响72-73
• 3.5.6 HET0016对不同药物处理后Phe预收缩主动脉张力的影响73-74
• 3.5.7 20-HETE对离体小鼠主动脉张力的影响74-75
• 3.6 讨论75-77
• 结论与展望77-79
• 参考文献79-83
• 攻读硕士学位期间取得的研究成果83-84
• 致谢84-85
• 附件85

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 李倩;张荣;吕昌莲;刘艳;王珍;朱大岭;;Kv通道亚型在15-HETE收缩肺动脉过程中的作用[J];药学学报;2006年05期

2 ;[J];;年期

中国重要会议论文全文数据库 前2条

1 王志刚;李郁梅;吕昌莲;郑晓东;鲍岩岩;唐晓波;朱大岭;;20-HETE对牛肺动脉平滑肌细胞的保护作用[A];第六届海峡两岸心血管科学研讨会论文摘要集[C];2007年

2 郑晓东;梁淑俊;戴丽娟;朱大岭;;15-HETE升高肺动脉平滑肌细胞内钙中钙的来源探究[A];药学发展前沿论坛及药理学博士论坛论文集[C];2008年

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 赵永攀;CYP4A11代谢生成的20-HETE对小鼠血压的影响及其血管张力的调控[D];华南理工大学;2016年

  本文关键词：CYP4A11代谢生成的20-HETE对小鼠血压的影响及其血管张力的调控，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：433346