IL-22对HUVECs细胞因子表达、增殖功能及屏障功能的影响

发布时间：2017-06-10 03:05

  本文关键词：IL-22对HUVECs细胞因子表达、增殖功能及屏障功能的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:通过检测IL-22(白细胞介素22)在细胞因子表达、细胞增殖功能以及屏障功能方面对HUVECs(人脐静脉内皮细胞)的影响,来探讨IL-22对血管炎发生发展的影响。方法:1.用半定量RT-PCR技术检测IL-22R1在HUVECs中的表达情况。2.实时定量PCR技术以及Western blot技术分别用于检测IL-22作用前后IL-6,IL-8,CCL2,ICAM1,VCAM1,CXCR4及CCL20等细胞因子在HUVECs中m RNA水平以及蛋白质水平的表达变化情况。3.通过CCK8实验检测不同浓度的IL-22作用前后HUVECs的增殖能力变化情况与不同浓度的LPS对HUVECs的增殖抑制情况。另外将不同浓度的IL-22作用于HUVECs预处理24h后,再将等浓度的LPS作用于细胞24h,最后用CCK8实验来检测IL-22对LPS的增殖抑制是否有对抗作用。4.用FITC标记的右旋糖酐通过HUVE单层细胞的渗透率来检测不同浓度的IL-22作用前后HUVECs的屏障功能变化情况以及不同浓度的LPS对HUVECs屏障功能的影响。另外将不同浓度的IL-22作用于HUVECs预处理24h后,再将等浓度的LPS作用于细胞24h,最后用FITC标记的右旋糖酐通过HUVE单层细胞的渗透率来检测IL-22对LPS的屏障破坏是否有对抗作用。结果:1.IL-22R1 m RNA在HUVECs中持续表达。2.IL-22作用于HUVECs后,趋化因子CCL2和CCL20的表达在m RNA水平及蛋白质水平均可见明显增加,而炎症因子IL-6及IL-8的表达则未见明显变化。3.IL-22作用于HUVECs后,HUVECs的增殖率得到显著提高。LPS可以显著抑制HUVECs的增殖率。被IL-22预处理过的HUVECs其增殖率不受LPS的抑制。4.IL-22作用于HUVECs后,HUVECs的渗透率下降,occludin的表达增强。LPS可以提高HUVECs的渗透率并降低occludin的表达。被IL-22预处理过的HUVECs其渗透率受LPS的影响减少,occludin的表达情况同单独用IL-22作用后相似。结论:1.IL-22的受体IL-22R1在HUVECS中广泛表达,表明HUVECs是IL-22作用的靶细胞之一。2.IL-22还可以提高趋化因子CCL2与CCL20的表达,却对炎症因子IL-6及IL-8的表达无明显影响,表明IL-22在炎症反应主要起到对抗炎细胞的趋化作用而非促炎作用。3.IL-22不仅可以提高HUVECs的增殖能力,还可以抑制由LPS诱导的HUVECs增殖抑制。4.IL-22不仅可以通过增强occludin的表达来提高HUVECs的屏障功能,还可以通过该机制对抗由LPS引起的HUVECs屏障功能下降。
【关键词】：白细胞介素22 炎症 脂多糖 血管炎 白塞氏病
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R543
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照4-5
• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-11
• 第一部分 IL-22R1在HUVECs中的表达11-17
• 1 材料与方法11-16
• 2 结果16
• 3 讨论16-17
• 第二部分 IL-22 对HUVECs中细胞因子表达的影响17-26
• 1 材料与方法17-23
• 2 结果23-25
• 3 讨论25-26
• 第三部分 IL-22 对HUVECs增殖功能的影响26-32
• 1 材料与方法26-28
• 2 结果28-30
• 3 讨论30-32
• 第四部分 IL-22 对HUVECs屏障功能的影响32-40
• 1 材料与方法32-36
• 2 结果36-39
• 3 讨论39-40
• 全文总结40-41
• 参考文献41-46
• 文献综述：Th22在白塞氏病中的研究进展46-54
• 参考文献50-54
• 致谢54-55
• 攻读硕士学位期间发表的论文及成果55

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1 林芳珊;;人体八大屏障功能趣谈[J];健康生活;2007年06期

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本文编号：437243