急性心肌梗死大鼠心肌ASC、Caspase-1及IL-1β水平与心肌损伤标志物的关系
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【摘要】:目的:构建大鼠急性心肌梗死(Acute myocardial infarction,AMI)模型,比较AMI血清和心肌中凋亡相关斑点样蛋白(Apoptosis-associated Speck-like protein containing a CARD,ASC)、天冬酰胺特异酶半胱氨酸蛋白酶(Cysteine aspartate-specific proteinase,Caspase-1)和炎症因子-白细胞介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)的表达水平及其与心肌损伤标志物肌钙蛋白T(Troponin T,cTnT)、肌酸激酶同工酶(Creatine kinase-MB,CK-MB)、脑钠肽(Brain Natriuretic Peptide,BNP)的相关性,探讨其在AMI发生和发展中的作用。方法:通过结扎大鼠冠状动脉建立急性心肌梗死模型,实验分为对照组、假手术组及急性心肌梗死(AMI)组;AMI前及梗死后12和24小时分别经腹主动脉取血测定ASC、Caspase-1、IL-1β和心肌损伤标志物(cTnT、CK-MB、BNP)的表达;HE染色检测心肌坏死组织;TUNEL法检测凋亡心肌细胞;Western blot检测坏死区域心肌组织中ASC、Caspase-1和IL-1β蛋白表达;ELISA法检测坏死区域心肌组织中cTnT、CK-MB和BNP的表达;SPSS软件分析大鼠血清ASC、Caspase-1和IL-1β与心肌损伤标志物(cTn T、CK-MB、BNP)表达水平的相关性。结果:与假手术组、对照组比较,AMI组大鼠心脏肉眼可见明显的梗死区域,组织病理学检测显示心肌梗死区域出现明显的细胞水肿、坏死及中性粒细胞浸润的炎症反应和纤维增生;TUNEL检测发现梗死心肌组织中存在凋亡细胞;相对于对照组和假手术组,坏死区心肌组织中ASC、Caspase-1、IL-1β、cTnT、CK-MB和BNP的表达明显增加(P0.05);心肌梗死后12和24小时,血清中ASC、Caspase-1、IL-1β、cTn T、CK-MB和BNP的浓度呈时间依赖性升高;心肌梗死后24小时血清中ASC与Caspase-1(r=0.711,P0.01),ASC与IL-1β呈正相关(r=0.871,P0.01),Caspase-1与IL-1β呈正相关(r=0.796,P0.01);心肌梗死后24小时血清中ASC、Caspase-1、IL-1β浓度与心肌损伤标志物cTnT(ASC vs cTnT,r=0.957,P0.01;Caspase-1 vs cTnT,r=0.953,P0.01;IL-1βvs cTn T,r=0.953,P0.01)、CK-MB(ASC vs CK-MB,r=0.938,P0.01;Caspase-1 vs CK-MB,r=0.934,P0.01;IL-1βvs CK-MB,r=0.962,P0.01)和BNP(ASC vs BNP,r=0.929,P0.01;Caspase-1 vs BNP,r=0.927,P0.01;IL-1βvs BNP,r=0.969,P0.01)之间存在正相关。结论:大鼠AMI心肌中ASC、Caspase-1及IL-1β表达明显增加,并与心肌损伤标志物之间存在正相关,提示其可能参与了AMI的发生与发展。
【关键词】:急性心肌梗死 凋亡相关斑点样蛋白 天冬酰胺特异酶半胱氨酸蛋白酶 白细胞介素1β
【学位授予单位】:南华大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R542.22
【目录】:
- 主要英文缩略词索引4-6
- 摘要6-8
- Abstract8-13
- 第1章 绪论13-15
- 第2章 材料与方法15-25
- 2.1 材料15-18
- 2.1.1 实验动物15
- 2.1.2 主要仪器设备15-16
- 2.1.3 主要试剂16
- 2.1.4 试剂配制16-18
- 2.2 实验方法18-23
- 2.2.1 大鼠急性心肌梗死模型建立18
- 2.2.2 实验分组18
- 2.2.3 心肌组织HE染色18-19
- 2.2.4 大鼠血液生化指标分析19-20
- 2.2.5 TUNEL法检测细胞凋亡20-21
- 2.2.6 Western blot检测心肌组织ASC、Caspase-1 及IL-1β的表达量21-23
- 2.2.7 心肌组织c Tn T、CK-MB和BNP的表达量23
- 2.3 统计学分析23-25
- 第3章 结果25-33
- 3.1 大鼠急性心肌梗死模型的建立25-26
- 3.1.1 心肌梗死后大鼠心脏外观和病理组织的改变25
- 3.1.2 大鼠血清心肌损伤标志物的变化25-26
- 3.2 心肌细胞的凋亡和c Tn T、CK-MB及BNP的表达26-27
- 3.2.1 TUNEL检测心肌细胞的凋亡26-27
- 3.2.2 大鼠心肌损伤区域c Tn T、CK-MB和BNP的表达27
- 3.3 急性心肌梗死组织中ASC、Caspase-1 及IL-1β蛋白表达27-29
- 3.4 急性心肌梗死大鼠血清中ASC、Caspase-1 及IL-1β表达29-30
- 3.5 血清中ASC、Caspase-1 与IL-1β两两之间的相关性30-31
- 3.6 血清ASC、Caspase-1、IL-1β与心肌损伤标志物的相关性31-33
- 第4章 讨论33-37
- 第5章 结论37-39
- 参考文献39-45
- 文献综述 Caspase家族和冠心病研究现状及其进展45-55
- 参考文献50-55
- 读研期间发表的文章55-57
- 致谢57
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