心肌特异性敲除Cdc42对血管紧张素Ⅱ诱导心肌肥大的保护作用

发布时间：2017-07-17 07:10

  本文关键词：心肌特异性敲除Cdc42对血管紧张素Ⅱ诱导心肌肥大的保护作用

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【摘要】：研究背景:心肌肥大是以心肌纤维变粗为特征,继而导致心室壁增厚,心脏体积增大的心脏病症。它是高血压、心瓣膜病、先天性心脏病及动脉粥样硬化等心血管疾病的常见并发症。心肌肥大的发病机制目前尚未完全阐明。Cdc42(全称细胞分裂周期蛋白)是Rho小G蛋白家族中的小分子GTP酶,参与细胞周期调控和基因转录的调节,具有调节细胞骨架和细胞运动的功能。有文献表明,Cdc42在神经体液因子介导的心肌细胞肥大中起着重要作用,但其具体机制还不明确。本课题旨在观察特异性敲除心肌Cdc42对血管紧张素II诱导的小鼠心肌肥大模型的影响,并对其可能的作用机制进行了初步的探讨。方法与结果:1.心肌特异性敲除CDC42小鼠的制备:利用Cdc42 Flox小鼠与MLC-2v-CRE小鼠杂交后,得到心肌特异性敲除Cdc42的小鼠。结果显示,条件性敲除心肌Cdc42对小鼠的生长发育和繁殖没有影响,但其心肌Cdc42的mRNA和蛋白表达水平减少为对照组的30%。2.小鼠心肌肥大模型的制备:采用小鼠皮下微量泵持续两周注射AngiotensinⅡ1500ng/min/kg,建立小鼠心肌肥大模型。超声心动图数据分析表明Cdc42敲除鼠的左心肥厚的程度及心功能下降的程度明显低于对照组;此外,敲除小鼠的心肌肥厚标志因子脑钠肽(BNP)、β-肌球蛋白重链(β-MHC)的mRNA表达明显低于对照组。3.心肌特异性敲除Cdc42小鼠保护AngII诱导心肌肥大的可能机制:结果显示,心肌细胞缺失Cdc42时ERK表达明显下降,提示其可能通过影响Calcineurin信号通路实现其对心肌肥大的保护作用。结论:我们的研究表明,特异性敲除心肌Cdc42小鼠可明显保护AngII诱导的心肌肥大,其机制可能与抑制ERK表达,进而抑制Calcineurin信号通路实现其对心肌肥大的保护作用有关。
【关键词】：Cdc42 条件性敲除小鼠 AngiotensinⅡ 心肌肥大
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R542.2
【目录】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-9
• 第1章 绪论9-15
• 1.1 Cdc42与心肌肥大9-15
• 1.1.1 Cdc42简介9
• 1.1.2 Cdc42的生物学功能9-11
• 1.1.3 心肌肥大与血管紧张素Ⅱ（AngiotensinⅡ）11-12
• 1.1.4 心肌肥大的产生机制及肥大过程中胞内信号传导途径12-15
• 第2章 心肌特异性敲除Cdc42小鼠的鉴定与表型15-29
• 2.1 引言15
• 2.2 材料和方法15-29
• 2.2.1 试剂与材料15-16
• 2.2.2 小鼠基因型鉴定16-18
• 2.2.3 小鼠心脏组织RNA提取，，cDNA反转录及qRT-PCR18-21
• 2.2.4 HE染色、马森染色、天狼星红染色、小麦胚凝光素实验、免疫组化及Western blot等方法21-28
• 2.2.5 小鼠心肌肥大模型的构建28-29
• 第3章 Cdc42基因的缺失在Angiotension Ⅱ诱导的心肌肥大模型中的作用及其机制29-46
• 3.1 Cdc42基因敲除小鼠尾巴基因型鉴定29
• 3.2 小鼠心脏Cdc42特异性敲除情况的验证29-31
• 3.3 Cdc42基因的缺失对小鼠心功能及心脏结构形态的影响31-33
• 3.4 Cdc42基因的缺失在由AngiotensinⅡ诱导的心肌肥大模型中的作用33-43
• 3.4.1 小鼠超声心动图检测33-36
• 3.4.2 小鼠心脏形态及结构的观察36-38
• 3.4.3 小鼠心脏纤维化的观察38-39
• 3.4.4 心肌细胞横断面积的变化39-41
• 3.4.5 qRT-PCR检测心肌肥大相关的标志基因以及Cdc42相关因子的mRNA表达情况41-43
• 3.5 讨论43-46
• 3.5.1 小鼠心脏特异性敲除Cdc4243-44
• 3.5.2 Cdc42的敲除对小鼠心功能及心脏结构形态的影响44
• 3.5.3 Cdc42的敲除在由AngiotensinⅡ诱导的心肌肥大模型中发挥着保护作用44-45
• 3.5.4 Cdc42在由AngiotensinⅡ诱导的心肌肥大模型中发挥着促肥大的作用的可能机制45-46
• 全文总结46-47
• 致谢47-48
• 参考文献48-51
• 附录51-54
• 综述54-63
• 参考文献61-63

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 王海舟;;Cdc42的生物活性[J];萍乡高等专科学校学报;2010年03期

2 郑凌云;利用人源性血管紧张素Ⅱ构建大鼠心肌肥大模型的方法[J];卫生职业教育;2005年14期

3 朱正;Rho蛋白家族的生物活性[J];国外医学(生理、病理科学与临床分册);2002年03期

本文编号：552433