低浓度过氧化氢通过上调WDR26促进心肌细胞H9c2的增殖

发布时间：2017-07-29 23:17

  本文关键词：低浓度过氧化氢通过上调WDR26促进心肌细胞H9c2的增殖

  更多相关文章： 过氧化氢 低浓度 WDR26 心肌细胞 增殖

【摘要】：WDR26是从经历短暂缺血-再灌注的大鼠心肌组织中发现并表达上调的基因,又被命名为缺血预适应上调基因2(myocardial ischemic preconditioning upregulated protein 2,MIP2),其Gen Bank登录号是AY221751。它的最大开放阅读框为1497bp,编码498个氨基酸。其编码肽链的C-端含5个WD40结构域,故为典型的WD-重复蛋白。该基因被证实对缺血-再灌注引起的心肌损伤有保护作用。缺血预适应、后适应发挥内源性心肌保护作用时,机体的活性氧产生也是增加的,但活性氧在其中所起的保护作用机制尚不清楚。本实验采用大鼠心室肌H9c2细胞株,运用外源性低浓度过氧化氢作用于细胞,通过不同作用时间及不同作用浓度,采用MTT比色法、流式细胞术等方法,观察低浓度过氧化氢对细胞的增殖影响。结果显示:低浓度的H2O2(12~50μmol/L)刺激后的细胞数目及570 nm的吸光度值增加,活细胞数目增多;细胞流式术显示低浓度过氧化氢细胞的DNA合成增加,细胞增殖明显,说明低浓度的H2O2有明显的促进细胞增殖的作用。结果还显示,中等剂量的H2O2(500μmol/L)可引起H9c2细胞散在性固缩坏死及溶解坏死。说明不同剂量的过氧化氢作用于H9c2细胞,会引起明显不同的生物学效应。我们前期实验显示,WDR26与心肌缺血预适应的发生密切相关,且WDR26有抑制过氧化氢诱导的细胞凋亡的作用,那么活性氧促细胞增殖的机理是否与WDR26有关,目前还不清楚。本实验选择以Western Blot和RT-PCR的方法,研究WDR26在不同浓度及不同时间的H2O2处理H9c2心肌细胞后其表达的动态变化。结果发现,低浓度H2O2(12~50μM)处理后,WDR26的m RNA表达增加,于4h达高峰,然后逐步降低,24h时仍高于非处理组。WDR26蛋白质表达水平随着H2O2浓度的增加而升高。运用RNA干扰将WDR26基因沉默后,其促增殖作用明显减弱。上述结果说明,低浓度的H2O2是通过上调WDR26的表达来促进H9c2心肌细胞的增殖。
【关键词】：过氧化氢 低浓度 WDR26 心肌细胞 增殖
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R541.4
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 第1章 绪论11-15
• 第2章 低浓度过氧化氢促进H9c2 细胞增殖的研究15-20
• 2.1 实验材料15-16
• 2.2 实验方法16-17
• 2.3 实验结果17-19
• 2.4 小结19-20
• 第3章 H_2O_2促H9c2 细胞增殖过程中WDR26 基因的表达20-31
• 3.1 实验材料20-23
• 3.2 实验方法23-27
• 3.3 实验结果27-29
• 3.4 小结29-31
• 第4章 讨论31-33
• 第5章 结论33-34
• 参考文献34-39
• 文献综述39-49
• 参考文献43-49
• 作者攻读学位期间的发表的论文49-51
• 致谢51

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 荣彦生;吕鹏;王洪武;;腺苷联合冷血含钾停搏液在冠状动脉旁路移植术中的应用[J];山东医药;2014年36期

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 陈蒙蒙;一种非去极化心脏停跳液对血管内皮的保护作用及机制研究[D];北京协和医学院;2014年

，

本文编号：591557