高表达miR-133的大鼠BMSCs治疗心肌梗死的疗效分析

发布时间：2017-08-04 18:11

  本文关键词：高表达miR-133的大鼠BMSCs治疗心肌梗死的疗效分析

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【摘要】：目的:通过构建携带micro RNA-133(mi R-133)的慢病毒质粒感染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),使得mi R-133在BMSCs中高表达,观察其移植入大鼠心梗区域后对心肌梗死的治疗作用,并对其作用机制作初步研究。方法:在分离、培养SD大鼠BMSCs方面我们采用的是骨髓差异贴壁法,然后对其进行扩增和鉴定;使用脂质体转染法转染mi R-133-agomir(过表达)或mi R-133antagomir(抑制)以调控mi R-133在BMSCs内的表达水平,之后收集BMSCs并观察mi R-133对BMSCs的活力、凋亡的影响,再与心肌细胞共培养观察心肌细胞中Snail1基因的表达变化。构建携带绿色荧光蛋白(GFP)的mi R-133慢病毒载体并感染BMSCs,建立mi R-133高表达的BMSCs。然后采用冠状动脉左前降支结扎法建立大鼠心梗模型后,通过心肌内注射方法,分别将BMSCs-p CDH-mi R-133组,BMSCs-p CDH-vecto组,正常培养的BMSCs组及PBS组移植至心梗周边区域,并在术后第7天及第28天分别检测大鼠心梗后心功能变化,28天后取出心脏测算心梗面积评估治疗效果。结果:mi R-133-agomir转染后的BMSCs组中细胞凋亡的数量明显减少,在与心肌细胞共培养实验中此组也显著降低了Snail1基因的表达;我们成功构建mi R-133的慢病毒质粒并高效转染BMSCs,发现BMSCs-mi R-133移植组可以通过减少心梗后心脏的炎症侵润,减少梗死区域面积来起到缓解心肌梗死的作用,对心功能的恢复起到促进效果。结论:综上所述,mi R-133高表达可以减少BMSCs的凋亡;本研究成功构建高表达mi R-133的BMSCs;BMSCs-mi R133可以显著改善心梗后心脏功能,减少心脏梗死区域面积,这可能与BMSCs凋亡减少以及mi R-133抑制了心肌细胞(CMs)中Snail1基因的表达有关。本研究将为以后进一步利用基因修饰的BMSCs且使其更加适用于相关疾病的治疗提供了理论依据。
【关键词】：miR-133 骨髓间充质干细胞 心肌梗死
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R542.22
【目录】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-8
• 前言8-11
• 第一部分 转染R-133对BMSCS和心肌细胞的影响分析11-24
• 第一节 BMSCs、CMs 的分离、培养及 BMSCs 的鉴定11-15
• 第二节 转染 miR-133 对 BMSCs 影响的分析15-24
• 第二部分 高表达MIR-133质粒的构建24-30
• 1.实验仪器和实验试剂24
• 2.实验方法24-27
• 3.实验结果27-30
• 第三部分 高表达MIR-133的BMSCS对心梗的疗效评估30-38
• 1.实验仪器和实验试剂30-31
• 2.实验方法31-33
• 3.实验结果33-38
• 讨论38-45
• 结论45-46
• 参考文献46-51
• 综述51-59
• 参考文献56-59
• 中英文对照缩略词表59-60
• 攻读硕士学位期间公开发表的论文60-61
• 致谢61-63

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1 赵云峰;高表达miR-133的大鼠BMSCs治疗心肌梗死的疗效分析[D];苏州大学;2016年

2 鲁文东;病毒性心肌炎患儿循环血miR-1和miR-133的表达变化及临床意义研究[D];山东大学;2013年

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本文编号：620969