钠泵介导内质网应激参与心肌缺血再灌注损伤

发布时间：2017-08-10 14:26

  本文关键词：钠泵介导内质网应激参与心肌缺血再灌注损伤

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【摘要】：目的:在细胞水平上,探讨钠泵与心肌缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)损伤的关系、内质网应激与心肌缺血再灌注损伤的相关性。进一步研究钠泵信号通路是否通过内质网应激反应参与心肌缺血再灌注损伤。方法:原代心肌细胞培养成功后,细胞水平上构建缺氧复氧模型。缺氧复氧过程中,对各组采用不同的干预处理。实验分四组:(1)、正常对照组,(2)、缺氧复氧组(I/R),(3)、缺氧复氧+哇巴因组(Ouabain-I/R),(4)、缺氧复氧+地高辛抗血清组(Anti-Digoxin-I/R)。缺氧复氧完成后通过流式细胞仪,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;采用Western blot检测内质网应激指标及信号分子GRP-78以及促凋亡蛋白Bax表达水平。结果:1、流式结果:与对照组相比,I/R组细胞活性下降,凋亡率增高(P0.05)。与I/R组相比,Ouabain-I/R组细胞凋亡率增高(P0.05),Anti-Digoxin-I/R组细胞凋亡率减少(P0.05)。2、Western blot结果:与对照组相比,I/R组细胞Bax、GRP78蛋白表达量增高(P0.05)。与I/R组相比,Ouabain-I/R组细胞Bax、GRP78蛋白表达量增高(P0.05),Anti-Digoxin-I/R组细胞Bax、GRP78蛋白表达量减少(P0.05)。结论:1、缺氧/复氧加重心肌细胞凋亡。2、抑制钠泵活性加重缺血再灌注细胞内质网应激、加重心肌细胞凋亡,激活钠泵活性能够减轻缺血再灌注细胞内质网应激、减轻心肌细胞凋亡。3、钠泵可能通过诱导内质网应激参与心肌缺血再灌注损伤。
【关键词】：心肌缺血再灌注损伤 钠泵 内质网应激 细胞凋亡
【学位授予单位】：皖南医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R541.4
【目录】：

• 中英文缩略词对照表5-9
• 摘要9-10
• ABSTRACT10-12
• 前言12-17
• 研究内容与方法17-31
• 1.研究材料17-21
• 1.1 主要仪器17
• 1.2 主要试剂及耗材17-18
• 1.3 试剂配制18-21
• 2.研究方法21-30
• 2.1 心肌细胞原代培养21-23
• 2.2 免疫组化23-24
• 2.3 细胞缺氧复氧实验24
• 2.4 流式细胞仪检测细胞凋亡24-25
• 2.5 Western blot25-30
• 3.统计学方法30-31
• 结果31-35
• 讨论35-42
• 结论42-43
• 参考文献43-49
• 综述 心肌缺血再灌注损伤的研究进展49-64
• 参考文献58-64
• 附图64-65
• 作者简介及读研期间主要科研成果65-66
• 致谢66

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本文编号：651207