冠心病人血清外泌体miRNA表达谱分析

发布时间：2017-08-21 23:12

  本文关键词：冠心病人血清外泌体miRNA表达谱分析

  更多相关文章： 外泌体 微小RNA 高通量测序 冠心病

【摘要】：目的：外泌体(exosome)是由细胞分泌的一种囊泡样物质,直径在20-200nm,可通过在细胞、组织间传递蛋白及各种遗传物质参与血管生长、细胞增殖、肿瘤细胞侵袭与转移、免疫应答、抗原提呈等多种生理或病理反应,研究发现exosome包含有微小RNA(miRNA),由于exosome所提供的良好保护性,使得外泌体miRNA (exosomal miRNA)在人体液中有很好的稳定性。本研究尝试分析冠心病患者血清中的exosomal miRNA的表达情况,试图找出对冠心病有诊断意义的miRNA。方法：将入院患者依据临床诊断分为急性心梗组(10人)、不稳定心绞痛组(10人)、稳定性心绞痛(10人),并选择健康成人(10人)为对照组,空腹抽取静脉血(心梗患者发病12小时取血)分离出血清,提取exosome,对 exosome进行透射电镜观察和nanosight进行粒径测量以确定提取效果,提取exosomal RNA并测量含量、分子量分布,建立exosomal miRNA的cDNA文库并纯化,对cDNA文库进行鉴定后进行高通量测序,对测序结果进行分析。结果：电镜下观察exosome为囊泡状,大小、分布不均,直径在30-200nm,其外层为脂质包裹,粒径测量结果显示exosome平均粒径129 nm,混悬液浓度8.99×108/ml; Agilent2100测量各样品exosomal RNA在20到30nt处有较高分布,测量纯化后的cDNA峰值在146bp左右,符合miRNA测序要求。测序结果由信息生物学分析显示,41个miRNA文库,与已知miRNA库中相符的niRNA数量分别为AMI组915个、UA组859个、SCAD组775个、Health组822个,各组样品中匀以hsa-miR-451b, hsa-miR-451a、hsa-mir-486-1、hsa-mir-486-2、hsa-miR-486-5p、 hsa-miR-486-3p表达量较多,与对健康对照组相比急性心梗组患者血清exosome中miR-146b-5p表达水平明显升高。小结：通过血清exosome中miR-146b-5p在急性心梗的患者中有明显改变,对诊断一定指导意义。Analysis of expression profiling of serum exosomal microRNA on patients with coronary artery disease
【关键词】：外泌体 微小RNA 高通量测序 冠心病
【学位授予单位】：中国人民解放军医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R541.4
【目录】：

• 缩略词表5-6
• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-9
• 前言9-13
• 一、材料与方法13-25
• 二、结果25-34
• 三、讨论34-40
• 四、结论40-41
• 参考文献41-49
• 综述49-62
• 参考文献56-62
• 攻读硕士学位期间发表论文62-63
• 致谢63

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 王东关;孙善珍;王振光;王霞;;肿瘤exosome诱导特异性T杀伤细胞的研究[J];华西口腔医学杂志;2006年02期

2 王东关;孙善珍;王振光;施琳;王霞;;肿瘤exosome诱导的细胞毒性T细胞的特异性杀伤作用[J];山东大学学报(医学版);2006年02期

3 张在云;李希德;刘叶;王志仑;潘祥林;;肺癌细胞裂解物负载对树突状细胞分泌的exosome诱导抗肿瘤作用的影响[J];山东医药;2011年31期

4 萨仁高娃;吴岩;肖文华;;exosome与肿瘤免疫治疗的研究进展[J];感染.炎症.修复;2008年03期

5 金铮;于金录;杨Pr;李超;黄海燕;;胶质瘤来源exosome的鉴定及其蛋白质组成研究[J];中国实验诊断学;2010年09期

6 杜嘉瑞;张路遥;杨洪发;别黎;徐惠勇;陈立兵;鞠砚;;胶质瘤细胞来源exosome的鉴定及其蛋白组成研究[J];中国实验诊断学;2008年01期

7 张尧;张家摸;何百成;罗春丽;吴小候;;肾癌细胞来源exosome的制备和免疫相关蛋白组成的初步研究[J];重庆医科大学学报;2010年01期

8 元小宁;朱运峰;;外泌体(Exosome)及其在肿瘤调控中的作用[J];中国生物工程杂志;2013年08期

9 沈宜;向自武;陈国庆;谢莹珊;郑维萍;;As_2O_3联合H_(22)源exosome的抗肿瘤作用研究[J];激光杂志;2009年04期

10 耿建;金洁;陈龙邦;;以exosome为基础的肿瘤免疫治疗研究进展[J];医学研究生学报;2006年09期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 秦霞;邱峰;;近年来国内外关于exosome研究的文献计量学分析[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年

2 张琳;郑桂娜;万宇峰;郭一鸣;魏盼盼;郭金虎;;exosome复合物对生物钟基因表达的转录后调控研究[A];中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——2011年中国遗传学会大会论文摘要汇编[C];2011年

3 顾丽亚;惠杰;;大鼠骨髓间充质干细胞exosome对自身心肌分化及抗凋亡实验研究[A];中华医学会第十五次全国心血管病学大会论文汇编[C];2013年

4 孙祯;宋亚军;黄赤兵;;大鼠肠系膜淋巴结和外周淋巴结固有exosome的制备[A];2013中国器官移植大会论文汇编[C];2013年

5 徐保锋;黄海燕;关毅;吴宣萱;;胶质瘤源性exosome的研究进展[A];2011中华医学会神经外科学学术会议论文汇编[C];2011年

6 Hong-Wei Wang;;Alternative pathways of RNA recruitment in yeast exosome revealed by single particle electron microscopy[A];中国生物化学与分子生物学会第十一次会员代表大会暨2014年全国学术会议论文集——专题报告一[C];2014年

7 ;Characterations and functions of exosome[A];2012全国临床微生物与感染免疫学术研讨会论文集[C];2012年

8 孙祯;黄赤兵;;各淋巴组织源性exosome的收集方法比较的研究[A];2012中国器官移植大会论文汇编[C];2012年

9 宋亚军;黄赤兵;;探讨小鼠肠系膜淋巴结exosome对外周血T细胞增殖的影响[A];2013中国器官移植大会论文汇编[C];2013年

10 卜宁;孙秉中;李奇灵;于华;;K562细胞分泌的exosome电镜标本的制备及观察[A];中华医学会第八次全国血液学学术会议论文汇编[C];2004年

中国博士学位论文全文数据库 前7条

1 卜宁;慢性髓细胞白血病细胞分泌的exosome的抗白血病作用研究[D];第四军医大学;2006年

2 王东关;负载exosome的树突状细胞诱导抗舌鳞癌效应的研究[D];山东大学;2006年

3 彭澎;卵巢癌患者腹水来源exosome对机体抗卵巢癌免疫功能影响的实验研究及其蛋白质组成分析[D];中国协和医科大学;2007年

4 吴尘轩;增强树突状细胞及其相关exosome抗肝癌免疫效应的实验研究[D];天津医科大学;2008年

5 黄海燕;胶质瘤及胶质瘤细胞株源exosome的蛋白质组学研究[D];吉林大学;2008年

6 余雪松;口服RDP58肽诱导的Treg源性exosomes抑制大鼠肾移植排斥的研究[D];第三军医大学;2012年

7 郭军;热休克肿瘤细胞上清及EXOSOME中趋化因子的发现及一种非细胞结构性新型高效肿瘤疫苗的研究[D];第二军医大学;2002年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 杜嘉瑞;胶质瘤来源exosome的鉴定及其蛋白组成研究[D];吉林大学;2007年

2 张路遥;胶质瘤源性exosome分离和提纯的实验研究[D];吉林大学;2007年

3 孙祯;肠系膜淋巴结固有exosome的制备及其对异体淋巴细胞增殖的影响[D];第三军医大学;2013年

4 顾丽亚;大鼠骨髓间充质干细胞exosome对自身心肌分化及抗凋亡实验研究[D];苏州大学;2013年

5 李超;胶质瘤源性exosome的提取及其蛋白组成研究[D];吉林大学;2011年

6 孙斐;exosome在胃癌患者血清中的表达及临床意义[D];苏州大学;2014年

7 张月静;miR-21-4T1细胞的构建及其exosome功能的初步研究[D];河北医科大学;2014年

8 向自武;As_2O_3对H_（22）细胞源exosome外泌的影响及其与exosome联合应用的治疗性研究[D];重庆医科大学;2009年

9 陈炯煌;基于exosome裂解超滤液的DC/CTL细胞诱导及其治疗胰腺癌的实验研究[D];浙江大学;2015年

10 亓洪昭;红细胞外泌体为载体靶向肿瘤药物投递研究[D];天津大学;2012年

，

本文编号：715671