转化生长因子β和基质金属蛋白酶在大鼠动脉钙化发病的实验研究

发布时间：2017-09-23 17:03

  本文关键词：转化生长因子β和基质金属蛋白酶在大鼠动脉钙化发病的实验研究

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【摘要】：研究目的：1.建立大鼠动脉钙化模型,观察大鼠胸腹动脉病理切片的差异。2.通过实时荧光定量PCR法,检测并观察TGF-β和MMPs的mRNA在大鼠动脉钙化模型的表达情况,并探讨和阐述其在大鼠动脉钙化形成过程中的作用及意义。3.通过安捷伦大鼠全基因组表达芯片检测,观察对照组与实验组大鼠动脉钙化的差异基因,并探讨差异基因在大鼠动脉钙化形成过程的作用及意义。方法：用随机数字表法将60只SD雄性大鼠分成2组：正常对照组和实验组,每组30只。通过使用本课题研究人员方法,皮下注射维生素D3溶液建立大鼠动脉钙化模型。两周后取大鼠胸腹主动脉并分为两部分,将一部分用于石蜡包埋,为下一步做蜡块切片使用,将另一部分保存于液氮,为下一步提取RNA及全基因组表达芯片使用。通过苏木精-伊红(HE)染色法观察两组大鼠胸腹动脉血管组织切片的病理差异,Von Kossa染色(钙染色法)观察两组大鼠胸腹动脉血管内层膜组织切片的钙盐沉积程度；实时荧光定量PCR法测定两组大鼠动脉TGF-β和MMPs的mRNA表达量水平。Agilent大鼠全基因表达芯片检测两组大鼠动脉血管组织的差异基因。结果：1.Von Kossa染色结果显示,实验组大鼠动脉内膜出现大片连续性黑褐色钙盐沉积,对照组大鼠动脉组织则光滑完整,无黑褐色钙盐沉积。2.实时荧光PCR及大鼠全基因表达芯片结果显示,在成功建立的大鼠动脉钙化模型中,实验组TGF-β的mRNA表达量显著高于正常对照组(P0.05)；3.实时荧光PCR及大鼠全基因表达芯片结果显示,在成功建立的大鼠。结论：在大鼠动脉血管组织中,高表达量的TGF-β和MMPs可导致动脉组织钙化的形成。
【关键词】：动脉钙化 基质金属蛋白酶2 基质金属蛋白酶9 转化生长因子β
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R543.5
【目录】：

• 个人简历3-6
• 中英文缩略词表6-7
• 中文摘要7-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-14
• 第一部分14-22
• 1、材料与方法14-15
• 2. 实验方法15-17
• 3、结果17-18
• 4、讨论18-21
• 5、结论21-22
• 第二部分22-36
• 1、材料与方法22-23
• 2. 实脸方法23-28
• 3、统计学分析28
• 4、实时焚光RT-PCR数据分析28-29
• 5、结果29-32
• 6、讨论32-35
• 7、结论35-36
• 第三部分36-64
• 1、材料与方法36
• 2、实验方法36
• 3、芯片实验36-37
• 4、差异基因的筛选37-38
• 5、结果38-45
• 6、芯片实验结果与RT-PCR实验结果的比较45-46
• 7、差异基因的筛选结果46-60
• 8、讨论60-63
• 9、结论63-64
• 参考文献64-67
• 文献综述67-75
• 参考文献73-75
• 致谢75-76
• 硕士期间发表的论文76-77
• 附件77-79

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 曾晓东;覃晓;王会雄;韦肖敏;卢海林;;还原型谷胱甘肽对大鼠动脉钙化模型的影响与作用机制[J];广西医科大学学报;2014年04期

2 王会雄;覃晓;曾晓东;韦肖敏;陈小婷;;辛伐他汀对大鼠动脉钙化组织中基质金属蛋白酶表达的影响[J];广西医学;2015年01期

3 田卫东,王大章;生长因子网络调节对骨形成作用的研究Ⅰ.TGF-β对人胚成骨样细胞增殖及分化的影响[J];华西口腔医学杂志;1998年01期

4 何冰;周欣;郝倩;王得顺;李贺;;骨质疏松及维生素D与动脉硬化性心血管病[J];中华老年心脑血管病杂志;2012年05期

5 Sinee Disthabanchong;;Vascular calcification in chronic kidney disease: Pathogenesis and clinical implication[J];World Journal of Nephrology;2012年02期

6 杨梅;周建光;曹海涛;曹雪滨;;实验动物动脉粥样硬化模型的建立及评价[J];医疗装备;2010年06期

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本文编号：906417