乙琥胺治疗老年性耳聋的实验性研究
发布时间:2017-10-10 04:35
本文关键词:乙琥胺治疗老年性耳聋的实验性研究
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【摘要】:目的观察乙琥胺对老年性耳聋小鼠模型NOD/LtJ小鼠的耳聋保护作用,并探讨乙琥胺延缓小鼠听力损失的可能机制。方法①将耳聋小鼠模型NOD/LtJ小鼠随机分为乙琥胺治疗组与对照组,在小鼠3周龄时,治疗组小鼠给予每天200 mg/kg乙琥胺灌胃治疗,对照组给予同剂量的PBS对照治疗。分别在小鼠生后第4、6、8周检测两组小鼠的听性脑干反应(ABR)与畸变产物耳声发射(DPOAE)对比观察两组小鼠的听力变化②在第8周取两组小鼠耳蜗进行耳蜗基底膜铺片,观察两组小鼠耳蜗基底膜毛细胞掉落情况。③同样取第8周两组小鼠耳蜗,通过免疫荧光技术对比观察两组小鼠耳蜗毛细胞内凋亡蛋白Caspasse-3含量变化。④通过实时定量荧光PCR技术检测两组小鼠第8周耳蜗内凋亡基因caspasse-3的表达。结果1.连续对照比较两组小鼠click声ABR值可见两组小鼠听力阈值都呈现增长趋势,但乙琥胺治疗组小鼠比对照组小鼠ABR值增长缓慢且阈值低。在第8周测得治疗组小鼠纯音8、16、32kHz频率ABR值均低于对照组,差异有显著性(P0.05)。2.在第8周测试治疗组与对照组小鼠的DPOAE值,可见在低频刺激声17672Hz前,测得两组小鼠DPOAE值差异不明显(P0.05)。而在高频24990Hz时,测得两组DPOAE值差异有统计学意义(P0.05)。3.在用乙琥胺治疗NOD/LtJ小鼠5周后观察治疗组小鼠与对照组小鼠耳蜗毛细胞脱落情况,可见在耳蜗基底膜顶环与中环,两组小鼠外毛细胞脱落都较少,未见内毛细胞脱落。而在基底膜底环中,两组小鼠外毛细胞均有脱落,但治疗组小鼠较对照组小鼠脱落的毛细胞数目明显减少。4.在用乙琥胺治疗NOD/LtJ小鼠5周后处死两组小鼠后观察两组小鼠耳蜗毛细胞中凋亡相关蛋白Caspasse-3的变化,可见治疗组中小鼠的内、外毛细胞中Caspasse-3蛋白的荧光信号弱于对照组中Caspasse-3蛋白的荧光信号。5.用rt-PCR方法定量检测乙琥胺治疗5周后检测治疗组小鼠与对照组小鼠耳蜗中凋亡相关基因mRNA的含量,结果显示治疗组caspasse-3 mRNA含量较对照组减少,差异有显著性(P0.05)。结论本实验通过对乙琥胺治疗组NOD/LtJ小鼠与对照组小鼠的听力功能检测、耳蜗基底膜毛细胞的组织学观察以及相关凋亡基因表达的检测,认为乙琥胺有保护耳聋小鼠听力功能的作用,且主要是通过抗凋亡途径来延缓小鼠听力损失的进展。
【关键词】:乙琥胺 老年性耳聋 小鼠模型 凋亡 Caspasse-3
【学位授予单位】:滨州医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R764.43
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本文编号:1004393
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