抗PDGFR-α抗体在铁锈诱导人视网膜色素上皮细胞增殖过程中的作用
本文关键词:抗PDGFR-α抗体在铁锈诱导人视网膜色素上皮细胞增殖过程中的作用
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【摘要】:目的 应用铁锈诱导hRPE细胞使其发生增殖分化,抗PDGFR-α抗体能为抑制剂,研究抗PDGFR-α抗体能有效的抑制hRPE细胞的增殖及其发生机制。 方法 1.体外培养hRPE-19细胞,取对数期的细胞进行实验,,普鲁士蓝染色观察细胞吞噬铁锈颗粒的情况。 2.利用0.1mg Fe203处理hRPE-19细胞,不同浓度抗PDGFR-α抗体作用于hRPE-19细胞,采用台盼蓝染色检测细胞存活率。 3.实验分成三组:空白对照组、铁锈组、实验组(铁锈颗粒加1、l0、50和l00μg·ml-1抗PDGFR-α抗体处理),分别在作用0、12、24、48h后采用MTT比色法检测抗PDGFR-α抗体对铁锈诱导hRPE细胞增殖的影响。 4. RT-PCR检测hRPE细胞中VEGF和TNF-αmRNA的表达。 结果 1.普鲁士蓝染色观察hRPE细胞有吞噬铁锈Fe_2O_3的能力。 2.台盼蓝染色检测到hRPE-19细胞的存活力均大于80%,随着抗PDGFR-α抗体浓度的增加hRPE-19细胞的增殖率减少。 3. MTT检测不同作用时间抗PDGFR-α抗体对hPRE增殖的影响,各浓度抗PDGFR-α抗体都有抑制RPE细胞增值的作用。 4.用不同时间后,所有实验组的hPRE-19细胞培养孔A值与培养0h的对照组相比较差异都有统计学意义(P<0.05)。不同浓度抗PDGFR-α抗体对hRPE增殖的影响,实验组(1、10、50μg·m~(I-1))培养孔A值与铁锈组比较差异有统计学意义(P<0.05)。实验结果发现浓度为50μg·m~(I-1)抗PDGFR-α抗体为抑制hRPE-19细胞增殖分化的最佳浓度。 5. RT-PCR检测hRPE细胞中,抗PDGFR-α抗体通过抑制VEGF和TNF-α mRNA的表达机制来抑制细胞的增殖。 结论 1.抗PDGFR-α抗体能有效的抑制体外培养的hRPE细胞的增殖,且呈在一定范围内呈剂量依赖关系。 2.50μg·m~(I-1)为抑制hRPE细胞的增殖最为有效的浓度。 3.抗PDGFR-α抗体可以使VEGF和TNF-α mRNA表达下调,证实抗PDGFR-α抗体是通过抑制VEGF和TNF-αmRNA表达机制来抑制RPE细胞的增殖。
【关键词】:血管内皮生长因子 视网膜色素上皮 血小板源性生长因子α受体 肿瘤坏死因子α
【学位授予单位】:辽宁医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R774.1
【目录】:
- 中文论著摘要4-6
- 英文论著摘要6-8
- 英文缩略图表8-9
- 前言9-10
- 实验材料与方法10-18
- 结果18-22
- 讨论22-26
- 结论26-27
- 本研究创新性的自我评价27-28
- 参考文献28-31
- 附图31-33
- 附录33-49
- 综述33-46
- 参考文献40-46
- 在学期间科研成绩46-47
- 致谢47-48
- 个人简介48-49
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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本文编号:1011304
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