STAT3、Cyclin D1蛋白在EGCG促进鼻咽癌细胞CNE-2凋亡中的表达变化及意义

发布时间：2017-10-31 13:03

  本文关键词：STAT3、Cyclin D1蛋白在EGCG促进鼻咽癌细胞CNE-2凋亡中的表达变化及意义

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【摘要】：目的：鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，简称NPC)系恶性程度较高的头颈部肿瘤，在世界各大洲均有发现，但欧洲、美洲、大洋洲和拉丁美洲国家较少，东南亚较高发，但日本和朝鲜鼻咽癌发病率均低于1/10万。它在我国则是一种常见的恶性肿瘤，且分布具有明显的地区性差异，广东、广西、福建、湖南等省发病率较高。现今鼻咽癌的治疗以放疗为主辅以化疗或手术等综合性治疗。Ⅰ期病例的综合治疗5年生存率可达95%，而Ⅳ期病人则仅为35%。大量研究表明，表没食子儿茶素没食子酸酯能够有效地降低肠癌、肺癌的的发生，，并具有抑制肿瘤生长的作用。本试验主要在于观察EGCG在体外的情况下对鼻咽癌CNE2细胞的影响，同时分析STAT3信号通路中的STAT3、Cyclin D1的蛋白表达变化，探讨STAT3信号通路在鼻咽癌发生发展过程中的机制，进一步分析EGCG在促进CNE2细胞凋亡中的作用。 方法：1.用不同浓度的EGCG分别处理CNE2细胞24h、48h、72h后，利用MTT比色法检测细胞增殖的情况，算出增殖抑制率。2.使用Hoechst33258荧光染色法观察经过不同浓度EGCG处理后的CNE2细胞，观察细胞凋亡情况，计算凋亡率。3.分别用流式细胞仪检测经过不同浓度EGCG处理过的CNE2细胞，观察其对鼻咽癌细胞周期的影响。4.通过蛋白印迹技术western blot方法检测不同浓度的EGCG对CNE2细胞中STAT3、Cyclin D1的不同时间点的表达变化的影响。 结果：1. MTT比色法结果显示，当提高EGCG的浓度及作用时间延长时，EGCG对CNE2细胞的增殖抑制作用增强，且呈浓度与时间依赖性（p0.05）。2. Hochest荧光染色的结果显示，EGCG处理CNE2细胞后出现了典型的凋亡的细胞形态学改变。与对照组比较，随着EGCG浓度的增加，凋亡细胞数不断增多（p＜0.05）。3.流式细胞仪检测不同浓度的EGCG分别干预后CNE2细胞24h、48h后，停滞在S、G1/G0的细胞与对照组相比，随着浓度的提高而增多。4. Western blot检测经过EGCG干预后的CNE2细胞中STAT3、CyclinD1蛋白表达量随着EGCG浓度的增加而表达降低。 结论：1. EGCG可能通过下调STAT3蛋白，作为EGCG抗鼻咽癌的生物学作用机制之一。3. EGCG抑制CNE2细胞的增殖，诱导其凋亡，可能与下调Cyclin D1蛋白的表达相关。
【关键词】：EGCG STAT3 CyclinD1 CNE2 凋亡
【学位授予单位】：桂林医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R739.63
【目录】：

• 中文摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• 英汉缩略词对照表9-10
• 前言10-12
• 1 材料与方法12-25
• 1.1 实验材料与仪器12-13
• 1.2 实验方法13-25
• 2 结果25-31
• 2.1 EGCG 对 CNE2 细胞增殖的抑制作用25-26
• 2.2 Hochest33258 染色观察 EGCG 诱导 CNE2 细胞的凋亡26-27
• 2.3 EGCG 对细胞周期的影响27-29
• 2.4 蛋白免疫印迹试验29-31
• 3 讨论31-38
• 4 结论38-39
• 参考文献39-45
• 综述45-52
• 参考文献49-52
• 致谢52

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 吴民华;陈小毅;蔡康荣;;JAK激酶抑制剂AG490对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖和凋亡的影响[J];癌症;2009年01期

2 王俊阁;李晓明;陈英会;路秀英;;信号转导和转录激活因子3在喉癌组织中的表达及临床意义[J];临床耳鼻咽喉头颈外科杂志;2007年03期

3 雷迅;刘强和;孔中雨;向秋;耿宛平;黄辉;董译元;刘芳贤;;EGCG对鼻咽癌细胞株裸鼠移植瘤的放疗增敏作用以及对Survivin表达的影响[J];山东大学耳鼻喉眼学报;2009年01期

4 李玲,张平,章崇杰,蔡美英;STAT3研究近况[J];心血管病学进展;2001年02期

5 崔巍;流式细胞术PI染色进行细胞周期分析的原理是什么?[J];中华检验医学杂志;2004年03期

本文编号：1122438