去整合素Echistatin对人晶状体上皮细胞增殖、黏附、移行的影响

发布时间：2017-11-06 09:35

  本文关键词：去整合素Echistatin对人晶状体上皮细胞增殖、黏附、移行的影响

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【摘要】：背景：随着白内障手术的日益开展,后发性白内障(posterior capsular opacification, PCO)的发生率逐渐增加,继而引起了广大医学界的不断重视,已有研究证明去整合素类药物对PCO有抑制作用,Echistatin (Ecs)为去整合素家族的一员。 目的：研究不同浓度的去整合素Echistatin (Ecs)对体外培养的人晶状体上皮细胞株SRA01/04增殖、黏附及移行的抑制作用,为活体动物实验摸索浓度条件,进一步为临床药物治疗PC0提供依据。 方法：实验分为三部分：(1)检测Echistatin对SRA01/04细胞增殖的影响：将消化收集的悬浮细胞接种于96孔培养板培养,细胞浓度为1×104个/孔,12h后弃原培养液,换无血清DMEM/F12培养液继续培养24h,使细胞同步化。弃旧培养液,加入不同浓度(0、2.5、5、7.5、10、15、0mg/L)的Echistatin,37℃、5%CO2条件下培养24、48、72h后,MTT法测定各孔吸光度值(A490)。(2)检测Echistatin对SRA01/04细胞黏附的影响：将消化收集的悬浮细胞接种于涂有鼠尾胶原的96孔培养板培养,细胞浓度为2.5×104个/孔,同时加入不同浓度(0、2.5、5、7.5、10、15、20mg/L)的Echistatin,37℃、5%CO2条件下共同培养90min后,用PBS清洗各孔两次,弃去未贴壁细胞,MTT法测定各孔吸光度值。(3)检测Echistatin对SRA01/04细胞移行的影响：将悬浮细胞接种于涂有鼠尾胶原的24孔培养板培养,细胞浓度为5×105个/孔,37℃、5%CO2箱培养。在细胞增殖达95%融合度时。用1000μ1移液器滴头划痕,PBS洗3次,各实验组分别加入不同浓度(0、2.5、5、7.5、10、15、20mg/L)Echistatin,继续培养24、48h后在倒置显微镜镜下记录划痕宽度的变化。 结果： 1.不同浓度去整合素Ecs(2.5、5、7.5、10、15、20mg/L)作用24、48、72h后对细胞株SRA01/04的增殖抑制率分别为2.6%、15.4%、21.2%、34.7%、46.1%、58.2%；6.6%、21.9%、38.2%、50.0%、60.7%、76.9%及9.8%、29.0%、46.6%、63.4%、69.1%、92.4%,除2.5mg/L组外,各浓度组吸光度值与0mg/L组比较均有统计学意义(P0.05或P0.01),且随Ecs作用时间的延长,细胞的吸光度值逐渐下降,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。 2.Ecs对各浓度组细胞株SRAOI/04的黏附抑制率分别为2.6%、15.0%、26.1%、35.3%、45.2%、54.5%,除2.5mg／L组外,各浓度组吸光度值与0mg/L组比较均有统计学意义(P0.05或P0.01)。 3.Ecs作用24、48h后各浓度组细胞株SRA01/04的移行距离与0mg/L组相比不同程度缩短,差异有统计学意义(P0.05或P0.01),且随Ecs作用时间的延长,细胞移行距离缩短,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。 结论： 1.Ecs可抑制LECs的增殖、黏附和移行,Ecs对PCO的防治可能起到积极作用。 2.为进一步的活体动物实验摸索浓度条件,并为临床上药物治疗PCO提供依据。
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R776.1

【参考文献】

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本文编号：1148349