腺病毒介导的slit2 shRNA转染缺氧诱导的人视网膜色素上皮细胞对VEGF表达的影响

发布时间：2017-11-17 13:03

  本文关键词：腺病毒介导的slit2 shRNA转染缺氧诱导的人视网膜色素上皮细胞对VEGF表达的影响

  更多相关文章： slit2 shRNA 视网膜色素上皮细胞 血管内皮生长因子

【摘要】：目的： 观察腺病毒介导的slit2shRNA转染缺氧诱导的人视网膜色素上皮细胞（retinal pigment epithelial cells RPE）对血管内皮生长因子（vascularendothelial growth factor VEGF）表达的影响，探讨slit2在脉络膜新生血管中的可能作用，为脉络膜新生血管（CNV）的治疗提供新的思路。 方法： 1.体外培养人RPE细胞，RT-PCR、免疫组化鉴定slit2及其受体在人RPE上的表达； 2.200μmol/L氯化钴建立化学缺氧模型，未缺氧细胞作为空白对照组，Real-TimePCR，western-blot观察slit2及受体、VEGF在缺氧状态下的表达变化； 3.将缺氧的RPE细胞随机分为Ad-shRNA（加入slit2shRNA），Ad-nμll（加入空腺病毒）、缺氧组。24h后收取细胞，Real-TimePCR、western-blot分别检测各组slit2及其受体、VEGF的mRNA和蛋白水平表达变化，ELISA检测上清中VEGF蛋白的表达变化。 结果： 1.在正常人RPE细胞，即有slit2及其受体Robo1、Robo4的表达； 2.与空白对照组相比，，缺氧组中slit2及其受体Robo1、VEGF的mRNA和蛋白水平的表达均明显增加(P0.05)；但受体R obo4无明显变化； 3.与缺氧组相比，slit2shRNA转染后Ad-shRNA处理组的slit2、Robo1、VEGF的mRNA和蛋白水平表达均降低（P0.05）； 4.缺氧组与Ad-nμll组之间slit2、Robo1、VEGF的变化无统计学意义（p0.05）； 结论： 研究表明slit2-Robo1信号通路参与了CNV的形成过程， slit2shRNA沉默RPE中slit2后，可明显抑制缺氧诱导的RPE中VEGF的表达，为临床CNV的治疗提供新的方向。
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R774.1

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 陈军;于东风;刘弋;杨锦雷;;Slit2/Robo1蛋白在直肠癌中的表达及与微血管密度的关系[J];安徽医药;2011年06期

2 季锐;卢雪峰;付金栋;姜旭生;雒燕;杨淑萍;;Slit2和Robo1蛋白表达与胃癌关系的临床研究[J];中国现代普通外科进展;2008年02期

本文编号：1196083