替普瑞酮对大鼠视网膜兴奋性损伤模型HSF1表达的影响
本文关键词:替普瑞酮对大鼠视网膜兴奋性损伤模型HSF1表达的影响
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【摘要】:目的:通过向大鼠玻璃体腔注射N-甲基-D-天冬氨酸(N-Methyl-D-aspartic acid,NMDA)制作视网膜兴奋性损伤模型,观察替普瑞酮(geranylgeranylacetone,GGA)对热休克转录因子1(heat shock transcription factor1,HSF1)表达的影响,从而进一步明确GGA诱导热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)表达的机制。 方法:将48只健康清洁级Wistar大鼠随机平均分为4组:分别为正常对照组、实验对照A组、实验对照B组以及实验组。正常对照组不行任何处理;实验组腹腔内注射GGA(800mg/Kg),实验对照A组、实验对照B组腹腔注射等量溶剂(10%DMS0)。腹腔注射后1h实验对照B组和实验组的每只大鼠随机抽取一只眼,将2μ1NMDA(80mmol/L)注入玻璃体腔内,做好标记;实验对照A组随机取一只眼行玻璃体腔穿刺并注射等量PBS。实验组及实验对照组于玻璃体腔穿刺后2h处死大鼠,正常对照组于实验开始后1h全部处死。HE染色观察视网膜形态学变化,采用RT-PCR分析视网膜中HSFlmRNA的表达,免疫组织化学染色方法检测P-HSF1-Ser326蛋白的表达。 结果:HE染色显示:正常对照组大鼠视网膜组织层次完整清晰,细胞形态规则,染色均匀;实验对照A组与正常组相比,视网膜组织结构、神经节细胞数目及形态无明显差别;实验对照B组大鼠较正常组大鼠视网膜神经纤维层水肿,视神经节细胞胞浆内出现空泡样变性,内核层、外核层排列疏松,但视神经节细胞数目及视网膜厚度未见明显变化;实验组大鼠视网膜损伤较实验对照B组明显减轻。RT-PCR结果显示:实验对照A组较正常对照组大鼠视网膜中HSFlmRNA的表达无明显差别;实验对照B组HSFlmRNA的表达量较前两组明显增加;实验组较正常对照组mRNA表达量增加,较实验对照B组无明显差别。免疫组织化学染色显示:正常对照组及实验对照A组视神经节细胞层、内核层及光感受器细胞层的内节只见微量的棕黄色颗粒沉积;实验对照B组视神经节细胞层、内核层、光感受器细胞层内节的棕黄色颗粒表达量较正常对照组及实验对照A组明显增加;实验组视网膜各层均可见大量棕黄色颗粒沉积阴性对照组均未见明显阳性染色。 结论:1、成功建立大鼠视网膜兴奋性损伤模型: 2、在兴奋性损伤模型中,GGA能于视网膜全层激活HSFl的活性,激活HSF1为GGA诱导视网膜表达HSP70的有效机制。
【学位授予单位】:青岛大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R774.1
【参考文献】
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,本文编号:1202755
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