Notch基因胞内活化部分真核表达载体p3XFLAG-CMV7-NICD1的构建与鉴定

发布时间：2017-11-26 04:20

  本文关键词：Notch基因胞内活化部分真核表达载体p3XFLAG-CMV7-NICD1的构建与鉴定

  更多相关文章： Notch信号通路 NICD 上皮间质转化 后囊膜混浊

【摘要】：目的构建Notch1基因胞内活化部分真核表达载体p3XFLAG-CMV7-NICD1,为进一步研究和解析Notch1基因在促进人晶状体上皮细胞间质化过程的作用做准备。方法从SRA01/04细胞中提取总RNA,RT-PCR法反转录合成c DNA。特异扩增目的基因片段NICD1,与p3XFLAG-CMV7载体连接后转化大肠杆菌DH5α,LB平板培养基筛选菌落,抽提质粒。并用酶切,测序,转染细胞后检测蛋白表达等方法验证。结果获得重组的p3XFLAG-CMV7-NICD1真核表达载体质粒,经双酶切及测序检测,NICD1基因插入载体部位正确,碱基序列正确。Western blot结果显示,在转染p3XFLAG-CMV7-NICD1的细胞中有NICD1蛋白的表达。结论 p3XFLAG-CMV7-NICD1真核表达载体质粒构建成功,为进一步研究Notch1传导通路与白内障摘除术后发生后囊膜混浊的关系奠定基础。
【作者单位】： 中国医科大学附属盛京医院眼科;沈阳市第四人民医院眼科;
【分类号】：R776.1
【正文快照】： 晶体后囊膜混浊(posterior capsular opacifica-tion,PCO)是白内障摘除术后最常见的并发症,常常导致术后视力下降。前囊膜上残留的细胞迁移到后囊膜并进行上皮细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是后囊膜混浊发生的关键。有研究表明Notch信号传导通路且

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 李明华;张芳婷;高书颖;于洁;;Notch1胞内段荧光表达质粒的构建及鉴定[J];现代肿瘤医学;2014年04期

2 黄飞;刘成福;王小琴;;γ分泌酶抑制剂DAPT对庆大霉素致大鼠耳损伤及修复过程中听力及Notch2/hes1信号通路表达的影响[J];听力学及言语疾病杂志;2013年03期

3 ;[J];;年期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 张芳婷;于洁;李明华;;Notch1胞内段荧光表达载体的构建及鉴定[A];第十二次全国医学遗传学学术会议论文汇编[C];2014年

中国博士学位论文全文数据库 前3条

1 窦国睿;Notch信号通路在脉络膜新生血管发生发展中的作用[D];第四军医大学;2011年

2 董潇;Dll4/Notch信号通路在脉络膜新生血管生成中的作用机制研究[D];第四军医大学;2010年

3 秦秀虹;Notch信号途径对高糖条件下NF-κB和PARP介导的视网膜细胞凋亡的保护作用[D];吉林大学;2011年

，

本文编号：1228534