siRNA沉默HIF-1α对缺氧培养的人脉络膜黑色素瘤细胞VEGF表达的影响

发布时间：2017-12-04 07:15

  本文关键词：siRNA沉默HIF-1α对缺氧培养的人脉络膜黑色素瘤细胞VEGF表达的影响

  更多相关文章： OCM-1细胞 缺氧诱导因子-1α 血管内皮生长因子 小RNA干扰 脂质体转染

【摘要】：目的：研究HIF-1α小干扰RNA(small interference RNA, siRNA)转染干扰缺氧诱导的OCM-1细胞前后HIF-1α和VEGF的表达情况,初步探讨HIF-1α在脉络膜黑色素瘤血管生成中的作用。 方法：体外培养人脉络膜黑色素瘤细胞(OCM-1),在培养基中加入CoCl2溶液至终浓度为100μmol/L,用于模拟肿瘤内缺氧微环境。生物公司设计并合成si RNA(包括HIF-1α siRN、β-actin siRNA及阴性对照),以阳离子脂质体(LipofectamineTM2000)为载体介导合成的siRNA转染OCM-1细胞。RT-PCR及Western-blot分别在mRNA和蛋白水平检测转染前后HIF-1α和VEGF表达的变化。 结果：与常氧组相比,单纯缺氧组HIF-11α mRNA表达无明显变化,差异无统计学意义(P0.05); HIF-1a蛋白表达上调,其差异有统计学意义(P0.01)；VEGFmRNA及蛋白表达均上调,差异均有统计学意义(P0.01)。缺氧状态下,与阴性对照组相比,干扰组HIF-11α mRNA和蛋白、VEGFmRNA和蛋白的表达均下调,且差异有统计学意义(P0.01)。结论：缺氧可诱导OCM-1细胞HIF-1α在蛋白水平表达上调,并通过转录激活VEGF的机制调控脉络膜黑色素瘤血管生成。合成的HIF-11α siRNA通过转染OCM1细胞成功地下调HIF-1α及其下游基因VEGI的表达。
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R739.7

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 黄磊,敖启林,李芳,邢辉,卢运萍,马丁;低氧对紫杉醇诱导的人卵巢癌细胞A278凋亡的影响及其机制[J];癌症;2005年04期

2 韩庆旺,樊燕蓉,傅更锋,刘新卷,徐根兴;RNA干扰对VEGF在人卵巢癌细胞中表达及细胞增殖的影响[J];第二军医大学学报;2005年09期

3 邹多宏;黄远亮;;低氧诱导因子-1α的研究进展[J];国际口腔医学杂志;2010年03期

4 程胜平;刘南植;;大肠腺瘤及癌组织中缺氧诱导因子-1α的表达及临床意义[J];浙江临床医学;2007年01期

5 王永来;刘彩刚;陈双;黄铄;;HIF-1α与VEGF在子宫内膜癌组织血管生成中的作用[J];中华肿瘤防治杂志;2007年15期

6 曾义;游潮;;RNAi技术及其在胶质瘤治疗中的研究进展[J];中华肿瘤防治杂志;2008年08期

7 曾伟;张建国;;siRNA沉默HIF-1α在缺氧状态下对鼻咽癌细胞VEGF表达的影响[J];现代中西医结合杂志;2009年21期

8 王敬俭;李静;耿美玉;;靶向缺氧诱导因子-1的抗肿瘤药物研究进展[J];药学学报;2008年06期

9 马超;周庚寅;肖颖;高鹏;张翠娟;;RNA干扰沉默缺氧诱导因子-1α逆转乳腺癌的耐药性[J];中华病理学杂志;2006年06期

10 段小军,杨柳,周跃,胡鸢;缺氧诱导因子1促进血管生成的调控机制[J];中华创伤杂志;2004年08期

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 裴志忠;HIF-1α对人肝癌细胞VEGF表达的影响[D];河北医科大学;2008年

，

本文编号：1250176