MicroRNA-34a对人鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠皮下移植瘤的生长抑制作用及分子机制研究

发布时间：2017-12-09 03:18

  本文关键词：MicroRNA-34a对人鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠皮下移植瘤的生长抑制作用及分子机制研究

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【摘要】：目的:探讨MicroRNA-34a(miR-34a)对鼻咽癌裸鼠皮下移植瘤的生长抑制作用及其可能的分子机制。方法:体外培养人鼻咽癌CNE-2细胞系,利用mi R-34a重组质粒及Scrambled mi RNA重组质粒分别构建miR-34a及阴性对照mi RNA稳定转染细胞株,q RT-PCR检测细胞内mi R-34a表达。选取6周龄雄性BLAB/c裸鼠15只,随机分为3组:mi R-34a组(5只),Scrambled mi RNA组(5只)及空白对照组(5只)。于裸鼠背部近右后肢皮下注射重组CNE-2细胞悬液,建立移植瘤模型,每7 d测定实验组与对照组肿瘤体积变化,饲养35 d后处死,完整取出肿瘤,测定肿瘤重量及终体积。提取肿瘤组织RNA及蛋白,采用qRT-PCR检测肿瘤组织中miR-34a的表达;分别采用q RT-PCR及免疫组化法检测细胞周期调控基因CDK6及抗凋亡基因Bcl-2 m RNA及蛋白的表达。结果:mi R-34a稳定转染CNE-2细胞后可显著提高细胞内mi R-34a表达量(P0.05)。15只裸鼠均成功构建皮下移植瘤模型,饲养21 d后,与Scrambled mi RNA组及空白对照组相比,mi R-34a组肿瘤体积显著减小(P0.05)。饲养35 d后,mi R-34a组、Scrambled mi RNA组及空白对照组肿瘤平均重量分别为(0.81±0.13)g、(1.47±0.21)g、(1.58±0.37)g,肿瘤平均终体积分别为(351.37±98.19)mm3、(798.75±91.04)mm3、(849.62±101.32)mm3,mi R-34a组肿瘤平均重量及肿瘤平均终体积均显著小于其余两组(P0.05)。mi R-34a组中mi R-34a的表达量显著高于其余两组(P0.05);mi R-34a组中CDK6及Bcl-2 m RNA及蛋白表达量显著低于其余两组(P0.05)。结论:miR-34a可能通过下调CNE-2细胞内CDK6及Bcl-2的表达水平从而抑制CNE-2细胞裸鼠皮下移植瘤的生长,发挥其抗肿瘤作用。
【作者单位】： 蚌埠医学院;第二军医大学附属长海医院实验诊断科;
【基金】：国家自然科学基金青年科学基金项目(81300748) 安徽省高等学校自然科学研究项目(No.KJ2015B0106y) 蚌埠医学院自然科学基金(BYKY1436)
【分类号】：R739.63
【正文快照】： 鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)是一种CNE-2细胞中稳定过表达miR-34a,并构建重组恶性程度较高的鼻咽部上皮细胞来源的恶性肿CNE-2细胞裸鼠皮下移植瘤模型,研究miR-34a对瘤[1],因其病变发展隐匿,大多数患者在就诊时已CNE-2细胞移植瘤的生长的抑制作用。通过检测肿处于肿

【参考文献】

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本文编号：1268891