视黄酸及LE540在早期形觉剥夺性近视豚鼠后极部巩膜中的作用

发布时间：2018-01-24 12:29

  本文关键词： 形觉剥夺性近视 视黄酸 巩膜 RARβ LE540 基质金属蛋白酶-2 细胞外基质 核心蛋白多糖　出处：《天津医科大学》2010年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】： 研究目的 建立早期形觉剥夺性近视(form-deprivation myopia, FDM)动物模型,检测豚鼠巩膜中视黄酸(retinoic acid, RA)及视黄酸受体β(retinoic acid receptorβ,RARβ)的水平；同时比较注射RARβ特异性抑制剂LE540和注射RA与对照组对屈光状态的影响,观察后极部巩膜病理变化,并检测巩膜基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和核心蛋白聚糖(decorin, DCN)的水平,探讨RA及RARβ在形觉剥夺性近视豚鼠后极部巩膜变化中的作用。 方法 第一部分：同批次3周龄英国种短毛三色豚鼠30只(中国医学科学院放射研究所动物中心提供),采用随机数字表法将动物分为3组,正常组6只,形觉剥夺15天组(FD 15 d)和形觉剥夺24天组(FD 24 d)各12只,实验眼均为左眼,右眼为自身对照眼。采用6号同色气球于豚鼠口鼻、双耳及对侧眼处开窗,制成大小合适的头套遮盖左眼,颈部以胶带固定防止脱落,分别饲养至15天和24天作为形觉剥夺动物模型。实验前后均测量屈光度,实验结束后摘除眼球,测量眼轴长,应用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)测定后极部巩膜RA含量,western blotting方法检测巩膜RARβ蛋白含量的变化。 第二部分：另选同种豚鼠30只,随机分为4组,Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ组各8只,Ⅳ组6只,为正常对照组。I组左眼球后注射0.1 g/L LE540 0.1ml,并用气球头套遮盖至第24天；II组左眼用气球头套遮盖24天；III组左眼球后注射0.4g/L RA 0.1ml,饲养至第24天。右眼为自身对照眼。实验前后均行视网膜检影测量屈光度,实验结束后取眼球测量眼轴长度,取巩膜做石蜡切片行病理学检查,用western blotting方法检测后巩膜细胞外基质中MMP-2及decorin蛋白含量的变化。计量资料数据以x±s表示,采用SPSS11.5统计学软件进行统计学处理,并进行正态分布及Levene方差齐性检验后行t检验和方差分析。 结果 第一部分：FD 15 d组、FD 24 d组动物实验眼诱导出明显的相对近视,且与正常组比较差异有统计学意义(F=23.053,P=0.000)。FD15d组、FD 24 d组实验眼眼轴均长于自身对照眼(P0.05)。FD 15 d组、FD 24 d组实验眼巩膜中RA水平较自身对照眼均明显升高(P0.01),但两组实验眼之间比较差异无统计学意义(P=0.857)。Western blotting所得RARβ的灰度图显示,FD 15 d组、FD 24d组实验眼巩膜RARβ较自身对照眼均增多,正常组、FD15 d组和FD 24d组实验眼巩膜中的RARβ/β-actin总体比较差异有统计学意义(F=20.527,P0.001),其中FD 15 d组和FD 24 d组实验眼间的RARβ/β-actin比较,差异有统计学意义(t=0.158,P=0.031),而且FD 15d组和FD 24 d组的实验眼分别与正常组相比,差异均有统计学意义(t=0.324,P0.001；t=0.482,P0.001)。 第二部分：实验干预后II和III组的实验眼形成相对近视,两组左右眼屈光度差异均有显著统计学意义(t=8.543,P=0.000；t=6.027,P=0.001)。其中,I组和II组实验眼的屈光度在实验前后差异分别为(-1.77±0.93)D和(-5.39±1.26)D,二者之间有显著统计学差异(P=0.000)；III组实验眼干预前后屈光度差别为(-3.73±0.79)D,实验前后差异有统计学意义(t=13.340,P=0.000)。实验干预后I组的左右眼眼轴长度相比差异无显著性统计学意义(t=1.635,P=0.146)；II组和III组干预后左右眼眼轴长度差异均有统计学意义(t=2.980,P=0.021；t=-4.100,P=0.005)。II组和III组实验眼后极部巩膜有明显病理性近视改变。I组、II组和III组实验后实验眼巩膜中的MMP-2/β-actin均明显升高(t=4.520,P=0.020；t=6.913,P=0.006；t=5.462,P=0.012)。I组、II组和III组实验后实验眼巩膜中的Decorin/β-actin均降低,与自身对照眼相比,I组差异无统计学意义(t=2.522,P=0.086),II组和III组有统计学意义(t=9.072,P=0.003；t=4.202,P=0.025)。 结论 形觉剥夺可导致轴性近视发生,近视程度在早期随时间明显递增,形觉剥夺眼眼轴增长；豚鼠早期形觉剥夺眼后极部巩膜RA及RARβ水平上调；外源RA可导致轴性近视；形觉剥夺和外源RA诱导的近视眼后极部巩膜中,细胞外基质分解活跃,MMP-2上调,Decorin下调；RA参与介导的形觉剥夺性近视的形成作用可被RARβ抑制剂LE540不完全抑制；RA-RARβ途径可能是导致FDM豚鼠后极部巩膜重塑的重要机制之一
[Abstract]:Purpose of study To establish an early form - deprivation myopia ( FDM ) animal model , to detect the level of retinoic acid ( RA ) and retinoic acid receptor 尾 ( RAR尾 ) in the sclera of guinea pig , and to compare the effects of injected RAR尾 specific inhibitor LE540 and injected RA and control group on refractive status , observe the changes of sclera in the posterior pole , and examine the role of RA and RAR尾 in the changes of sclera in the posterior pole of the guinea pig . method In the first part , 30 guinea pigs were randomly divided into three groups : three groups of three - week - old British short - haired three - color guinea pigs . The animals were divided into three groups by random number table method . In the second part , 30 guinea pigs were randomly divided into 4 groups , group 鈪，

本文编号：1460051