色素上皮衍生因子对氧诱导视网膜神经节细胞凋亡及Bcl-2表达的影响

发布时间：2018-05-19 07:40

  本文选题：氧诱导缺血性视网膜病变 + 色素上皮衍生因子　； 参考：《眼科新进展》2014年06期

【摘要】：目的探讨色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)对氧诱导缺血性视网膜病变(oxygen-induced ischemic retinopathy,OIR)小鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell,RGC)凋亡的抑制作用及其可能的机制。方法选择7 d龄C57BL/6J小鼠140只,随机分为正常对照组、OIR模型组、PBS治疗对照组和PEDF药物治疗组。选择右眼为实验眼,将除正常对照组外的所有小鼠建立OIR模型。PEDF药物治疗组分别于小鼠12 d龄和14 d龄给予两次玻璃体内注射PEDF(2μg·μL-1)各1μL,PBS治疗对照组玻璃体内注射等量的PBS(10 mmol·L-1,pH 7.4)。于17 d龄处死小鼠,各组随机抽取5只,摘除右眼球,采用TUNEL法检测视网膜细胞凋亡情况以及免疫荧光染色法检测Bcl-2蛋白在小鼠视网膜中的表达情况;其余小鼠过量麻醉处死后取出视网膜,采用Western blot检测Bcl-2蛋白以及Real-time RT-PCR检测bcl-2 mRNA的表达。结果视网膜细胞的凋亡主要在RGC层,OIR模型组小鼠RGC层细胞凋亡率为(55.044±14.538)%,明显高于正常对照组的(3.317±1.657)%,差异有统计学意义(P0.01);PBS治疗对照组细胞凋亡率为(55.852±4.490)%,明显高于PEDF药物治疗组的(5.897±2.079)%,差异有统计学意义(P0.01);正常对照组与PEDF药物治疗组细胞凋亡率比较,差异无统计学意义(P0.05)。免疫荧光显示,OIR模型组与PBS治疗对照组Bcl-2蛋白阳性染色较正常对照组明显减少,PEDF药物治疗组阳性染色较PBS治疗对照组增多。Western blot以及RT-PCR结果显示,OIR模型组Bcl-2蛋白和mRNA的表达量显著下降,分别为0.386 9±0.071 3和0.694 2±0.235 2,与正常对照组的0.778 7±0.097 4和1.000 0比较,差异均有统计学意义(均为P0.05);PEDF药物治疗组Bcl-2蛋白和mRNA的表达量分别为0.610 1±0.109 5和0.818 3±0.308 0,与PBS治疗对照组的0.284 8±0.153 6和0.481 0±0.100 8比较,差异均有统计学意义(均为P0.05);PEDF药物治疗组Bcl-2蛋白和mRNA的表达量较正常对照组低,但差异均无统计学意义(均为P0.05)。结论 OIR可引起视网膜细胞凋亡,尤其RGC的凋亡;PEDF可抑制凋亡并诱导视网膜Bcl-2表达上调,提示Bcl-2表达水平上调可能是PEDF发挥神经保护作用的机制之一。
[Abstract]:Objective to investigate the inhibitory effect of pigment epithelium-derived factor (PEDF) on oxygen-induced ischemic retinopathy (OIR) apoptosis in retinal ganglion cells (RGCs) of oxygen-induced ischemic retinopathy (OIR) mice and its possible mechanism. Methods one hundred and forty 7 day old C57BL/6J mice were randomly divided into two groups: the normal control group and the PEDF drug treatment group. All the mice except normal control group were treated with intravitreous injection of PEDF(2 渭 g 渭 L -1 at 12 d and 14 d, respectively. The control group was treated with intravitreous injection of PBS(10 mmol L 1 and pH 7.4. The mice were killed at the age of 17 days. Five mice were randomly selected from each group and the right eye ball was removed. The apoptosis of retinal cells was detected by TUNEL and the expression of Bcl-2 protein in the retina of mice was detected by immunofluorescence staining. The other mice were killed under excessive anesthesia. The Bcl-2 protein was detected by Western blot and the expression of bcl-2 mRNA was detected by Real-time RT-PCR. Results the apoptosis rate of retinal cells in the RGC layer OIR group was 55.044 卤14.538, which was significantly higher than that in the normal control group (3.317 卤1.657), and the difference was statistically significant (55.852 卤4.490,55.852 卤4.490,55.852 卤4.490,55.852 卤4.490,55.852 卤4.490,55.852 卤4.490,55.852 卤4.490) respectively. The difference was statistically significant in the treatment group (5.897 卤2.079g), and the apoptotic rate in the normal control group and the PEDF drug treatment group was higher than that in the control group. The difference was not statistically significant (P 0.05). The positive staining of Bcl-2 protein in the OIR model group and the PBS treatment control group was significantly lower than that in the normal control group. Western blot and RT-PCR showed that the Bcl-2 protein and protein in the PBS model group were significantly lower than those in the PBS control group. The expression of mRNA decreased significantly. They were 0.386 9 卤0.071 3 and 0.694 2 卤0.235 2, respectively, compared with 0.778 7 卤0.097 4 and 1.000 0 in normal control group. The expression of Bcl-2 protein and mRNA were 0.610 1 卤0.109 5 and 0.818 3 卤0.308 0 in the drug treatment group, respectively, compared with 0.284 8 卤0.153 6 and 0.481 0 卤0.100 8 in the PBS control group. The expression of Bcl-2 protein and mRNA in P0.05PEDF treatment group was lower than that in normal control group, but there was no significant difference (P0.05P 0.05). Conclusion OIR can induce retinal cell apoptosis, especially the apoptosis of RGC can inhibit apoptosis and induce the up-regulation of Bcl-2 expression in retina, suggesting that the up-regulation of Bcl-2 expression may be one of the neuroprotective mechanisms of PEDF.
【作者单位】： 上海交通大学医学院附属瑞金医院眼科;
【基金】：国家自然科学基金资助(编号:81170860) 上海市科委自然基金(编号:112R1422000)~~
【分类号】：R774.1

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 司俊康;郭俊国;王兴荣;;氧化应激诱导视网膜神经节细胞凋亡的研究进展[J];国际眼科杂志;2013年12期

2 姚慧萍;丁慰祖;;细胞因子对视网膜变性疾病防治作用的研究进展[J];临床眼科杂志;2013年04期

3 刘恬;项道满;江福能;;PEDF对人晶状体上皮细胞生长调控的体内外研究[J];南京医科大学学报(自然科学版);2013年10期

4 刘程程;叶红;;色素上皮衍生因子与宫颈癌的研究进展[J];海南医学;2014年01期

5 樊秋菊;杨春华;哈若水;高永斌;吴金花;;DTI技术多参数值对原发性开角型青光眼视路损伤程度的诊断价值[J];宁夏医学杂志;2014年03期

6 安鑫;王艳玲;;眼缺血综合征治疗进展[J];临床和实验医学杂志;2014年01期

7 杨巍;李长福;陈永胜;左永超;;三氧化二砷联合抗坏血酸抑制人肾癌786-0细胞增殖及相关蛋白表达的研究[J];现代肿瘤医学;2014年03期

8 熊淑毓;马明明;顾青;许迅;;碱性成纤维细胞生长因子对N-甲基-D-天冬氨酸诱导大鼠视网膜神经节细胞层损伤的保护作用[J];上海医学;2014年03期

9 刘晓坤;张晓宇;王峗;赵平;;米诺环素对大鼠视神经挫伤后视网膜Caspase-3表达的影响[J];眼科新进展;2013年12期

10 邹红;黎蕾;缪晚虹;;光动力疗法建立大鼠视网膜静脉阻塞模型[J];中国激光医学杂志;2013年06期

中国博士学位论文全文数据库 前6条

1 李旭;ROS依赖的内质网应激—自噬反应在醉茄素A诱导人胰腺癌细胞凋亡中的作用研究[D];华中科技大学;2013年

2 刘培辉;视网膜新生血管化相关因子基因多态性与ROP的关联研究[D];南方医科大学;2013年

3 梁娜;IUD出血副反应临床中医证候调查及宫宁颗粒调控模型大鼠子宫VSMC凋亡相关机制的研究[D];山东中医药大学;2013年

4 郭红宇;女性阴道炎患者阴道内环境中氧化应激状况及其致细胞凋亡的机制研究[D];兰州大学;2012年

5 王红阳;间歇低氧对大鼠认知功能和p38MAPK/神经细胞凋亡通路影响[D];天津医科大学;2011年

6 冯雪丹;自噬在实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠神经元退行性变中的作用及机制探讨[D];河北医科大学;2014年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 程沛林;OCT联合DTI在青光眼早期诊断中应用的研究[D];河北医科大学;2013年

2 曾晓波;糖尿病视网膜病变血清和玻璃体液VEGF及PEDF的定量分析[D];大连医科大学;2012年

3 赵颖;缺血导致大鼠视网膜形态、电生理及视觉行为变化的研究[D];暨南大学;2013年

4 白倩;醛糖还原酶在视神经损伤后的表达和作用[D];第四军医大学;2013年

5 金丽珠;不同钼水平对山羊瘤胃内环境及组织凋亡相关基因mRNA表达的影响[D];江西农业大学;2013年

6 杜安杰;氨基胍对ROP视网膜神经细胞凋亡及iNOS表达的影响[D];石河子大学;2013年

7 樊秋菊;3.0T MRI-DTI技术多参数值评价原性开角型青光眼视路损害的研究[D];宁夏医科大学;2013年

8 宋晓莲;色素上皮源性因子在心脑血管疾病中的应用[D];山东大学;2013年

9 张子燕;糖尿病肾病与糖尿病视网膜病变的相关性及危险因素分析[D];大连医科大学;2013年

10 黄兴华;Nogo基因及其信号通路蛋白在小鼠耳蜗表达的初步研究[D];中南大学;2013年

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 季迅达;色素上皮源性因子在眼部的作用研究[J];国外医学.眼科学分册;2003年04期

2 黄敏丽;PEDF与眼科疾病[J];广西医学;2004年06期

3 金姬,关明;色素上皮细胞衍生因子:一种高效的新生血管抑制因子[J];眼科新进展;2002年01期

4 刘庆淮,谢平;色素上皮衍生因子与视网膜疾病的研究进展[J];中华眼底病杂志;2003年01期

5 张雷,王康孙;色素上皮衍生因子与眼部新生血管性疾病[J];眼科新进展;2004年06期

6 史雪辉,何守志,赵世红;色素上皮衍生因子在大鼠脉络膜新生血管中的表达及意义[J];中华眼科杂志;2004年06期

7 赵晓娟,李彬;色素上皮细胞衍生因子在眼内抗血管生成作用的研究进展[J];国外医学.眼科学分册;2004年03期

8 张雷,王康孙,王玲,陈荣家;PEDF和VEGF mRNA在实验性脉络膜新生血管组织中的表达[J];眼科新进展;2004年02期

9 金姬,关明,马建兴,刘祖国;PEDF和VEGF在翼状胬肉组织中的不平衡表达[J];眼科研究;2004年05期

10 司马晶,James Fant,刘祖国;翼状胬肉与正常角膜和结膜的PEDF和VEGF水平[J];中国实用眼科杂志;2004年05期

中国重要会议论文全文数据库 前2条

1 宋晗;;葛根素对糖尿病大鼠视网膜PEDF表达的影响[A];第十届全国中西医结合眼科学术会议暨第五届海峡眼科学术交流会论文汇编[C];2011年

2 曹明芳;刘安;金威尔;;VEGF、bFGF、PEDF在视瞻昏渺发病机理的实验研究中的表达[A];全国第九次中医、中西医结合眼科学术年会论文汇编[C];2010年

中国博士学位论文全文数据库 前7条

1 童平;Hox基因在高糖诱导人视网膜色素上皮细胞增殖分化中的作用研究[D];中南大学;2010年

2 戴仪;重组人色素上皮衍生因子的制备及生物学活性研究[D];复旦大学;2010年

3 侯慧媛;骨髓来源细胞在脉络膜新生血管发生发展中的作用及其治疗潜能[D];第四军医大学;2010年

4 史雪辉;PEDF、TGF-β1在BN大鼠CNV中的表达及rhPEDF对CNV抑制作用的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2004年

5 刘姝;色素上皮源性因子基因转染抑制巨噬细胞诱发PVR的实验研究[D];吉林大学;2007年

6 马丽娜;色素上皮衍生因子联合巨噬细胞条件培养液或晶状体损伤对视神经损伤的修复作用[D];第四军医大学;2010年

7 高玉;microRNA在糖尿病大鼠视网膜中表达差异谱的研究[D];第二军医大学;2010年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 张小燕;PEDF基因多态性与渗出性年龄相关性黄斑变性危险性的研究[D];山东大学;2011年

2 夏伟;色素上皮衍生因子与炎症的相关性研究[D];重庆医科大学;2012年

3 曾晓波;糖尿病视网膜病变血清和玻璃体液VEGF及PEDF的定量分析[D];大连医科大学;2012年

4 姚明言;α-硫辛酸对高糖培养的人视网膜色素上皮细胞氧化应激以及分泌VEGF与PEDF的影响[D];河北医科大学;2013年

5 孙时磊;新生血管性青光眼患者血清及房水中PEDF、VEGF水平及其病因相关性研究[D];大连医科大学;2012年

6 江新利;色素上皮源性因子治疗糖尿病视网膜病变的机理研究[D];河北医科大学;2011年

7 李小璐;不同病程糖尿病大鼠视网膜病理改变及其VEGF、PEDF的动态表达[D];宁夏医科大学;2013年

8 付月;色素上皮衍生因子抑制碱烧伤角膜新生血管的机制研究[D];南方医科大学;2013年

9 刘宁宁;糖尿病视网膜病变大鼠模型中VEGF和PEDFmRNA的动态变化及意义[D];中国医科大学;2003年

10 党维华;糖尿病视网膜血管形态学变化与VEGF、PEDF表达相关性研究[D];吉林大学;2008年

，

本文编号：1909268