鸡胚Bmp4和Cath1原位杂交RNA探针的制备

发布时间：2018-05-25 10:32

  本文选题：探针制备 + 原位杂交　； 参考：《中华耳科学杂志》2014年03期

【摘要】：目的介绍一种鸡胚原位杂交探针制备方法。方法携带Bmp4和Cath1基因特异片段的质粒载体,通过质粒小提试剂盒扩增,限制性内切酶线性化,酚氯仿抽提纯化,T3 RNA聚合酶体外转录,合成地高辛标记的反义探针,通过电泳及鸡胚原位杂交检测探针的质量.结果获得了效果良好的Bmp4和Cath1的RNA探针.结论用质粒小提试剂盒对质粒载体扩增,进而通过线性化、纯化、转录等步骤来制备原位杂交探针的方法,具有时间短、费用低、质量高、杂交效果好等优点。
[Abstract]:Objective to introduce a method for preparation of chicken embryo in situ hybridization probe. Methods the plasmid vector carrying the specific fragments of Bmp4 and Cath1 gene was amplified by plasmid small extraction kit. The restriction endonuclease was linearized, the phenol chloroform was extracted and purified to transcribe the T 3 RNA polymerase in vitro, and the antisense probe labeled with digoxin was synthesized. The quality of the probe was detected by electrophoresis and in situ hybridization of chicken embryo. Results the RNA probes of Bmp4 and Cath1 were obtained. Conclusion the method of amplification of plasmid vector by plasmid small extraction kit and then preparation of in situ hybridization probe by linearization, purification and transcription has the advantages of short time, low cost, high quality, good hybridization effect and so on.
【作者单位】： 解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科解放军耳鼻咽喉研究所;
【基金】：国家自然基金专项基金项目(31140047)(31340055) 解放军总医院专利转化基金项目(42411D19) 解放军总医院苗圃基金项目(07MP24)联合资助
【分类号】：R764

【共引文献】

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本文编号：1933111