JNK细胞通路在高压氧和过氧化氢诱导人晶状体上皮细胞凋亡中的作用
本文选题:高压氧 + 过氧化氢 ; 参考:《眼科新进展》2014年10期
【摘要】:目的研究JNK细胞信号通路在高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)和过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)影响晶状体上皮细胞活力和凋亡中的作用。方法培养人晶状体上皮细胞系SRA01/04,实验分为对照组、SP600125组(20μmol·L-1)、HBO组(体积分数95%O2+体积分数5%CO2,600 Pa)、HBO+SP600125组、H2O2组(200μmol·L-1)和H2O2+SP600125组,处理6 h后收集细胞,应用MTT法检测各组细胞活力,Annexin V-FITC凋亡试剂盒处理细胞后用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,通过Western-blot法检测各组细胞JNK、p-JNK、c-Jun、p-c-Jun、caspase 3、caspase 9的表达情况。结果作用6 h后,HBO和H2O2处理的晶状体上皮细胞A570分别为0.423±0.047和0.406±0.069,较对照组的0.824±0.065明显下降(P0.05),细胞凋亡率为(19.773±1.147)%和(29.206±1.678)%,较对照组的(2.184±1.015)%明显上升(P0.05),SP600125可部分抑制HBO和H2O2对晶状体上皮细胞活力和凋亡的影响,HBO和H2O2处理的晶状体上皮细胞p-JNK、p-c-Jun蛋白表达量及caspase 3、caspase 9蛋白表达量升高,Sp600125可部分抑制高压氧和H2O2诱导的晶状体上皮细胞p-JNK、p-c-Jun、caspase 3、caspase 9蛋白高表达。结论 HBO和H2O2可激活晶状体上皮细胞中JNK细胞信号通路,促使细胞凋亡,提示JNK细胞信号通路在HBO和H2O2诱导晶状体上皮细胞凋亡的发生发展中起重要作用。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of hyperbaric oxygenation (HBO) and hydrogen peroxide (H 2O 2) on the viability and apoptosis of lens epithelial cells (LECs). Methods Human lens epithelial cell line SRA01 / 04 was cultured and divided into two groups: control group SP600125 (20 渭 mol L-1) and HBO group (95 渭 mol L-1). HBO SP600125 group was treated with H 2O 2 (200 渭 mol L -1) and H 2O 2 SP600125 group. The cells were collected after 6 h treatment. The apoptosis rate of each group was detected by flow cytometry after treated with Annexin V-FITC apoptosis kit, and the expression of JNK-p-JNKp-Junp-c-Juncaspase 3caspase 9 was detected by Western-blot. Results the A570 of lens epithelial cells treated with HBO and H 2O 2 were 0.423 卤0.047 and 0.406 卤0.069, respectively, which were significantly lower than those of the control group (0.824 卤0.065) (P0.05). The apoptosis rate was (19.773 卤1.147)% and (29.206 卤1.678). Compared with the control group (2.184 卤1.015)%, SP600125 could partly inhibit the inhibition of HBO and H _ 2O _ 2 on lens formation. The effects of HBO and H2O2 on the expression of p-JNK-c-Jun protein and caspase _ 3 caspase 9 protein expression in lens epithelial cells induced by hyperbaric oxygen and H _ 2O _ 2, the overexpression of p-JNKp-c-Juncaspase 3 caspase 9 protein in lens epithelial cells induced by hyperbaric oxygen and H _ 2O _ 2 was partly inhibited by the increase of the expression of p-JNKp-c-Juncaspase 3 caspase 9 protein in cultured lens epithelial cells induced by hyperbaric oxygen and H _ 2O _ 2. Conclusion HBO and H2O2 can activate the signal pathway of JNK cells in lens epithelial cells and promote the apoptosis of lens epithelial cells, suggesting that the signal pathway of JNK cells plays an important role in the development of apoptosis of lens epithelial cells induced by HBO and H2O2.
【作者单位】: 首都医科大学附属北京世纪坛医院眼科;北京大学人民医院眼科视觉损伤与修复教育部重点实验室;
【分类号】:R776.1
【共引文献】
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