视黄酸信号传递元件在豚鼠离焦型近视中的作用

发布时间：2018-11-13 18:28

【摘要】：目的建立豚鼠镜片诱导型近视眼模型(Lens induced myopia, LIM),观察豚鼠眼球后极部视网膜、脉络膜及巩膜中视黄酸(RA)、视黄酸受体β(RAR-β)和光感受器间维生素A类结合蛋白(IRBP)的表达变化,探讨视黄酸信号传递系统在豚鼠离焦型近视发生发展中的作用机制。方法 3～4周龄花色豚鼠65只随机分成3组,空白对照组13只(26个眼,n=26),离焦Ⅰ组和离焦Ⅱ组各26只(n=26)。空白对照组双眼不做任何处理,离焦Ⅰ组和Ⅱ组豚鼠左眼不戴镜作为自身对照眼,右眼戴-10.00D凹透镜,分别戴镜14d、28d后除去镜片,测量豚鼠戴镜前和戴镜后双眼屈光度及眼轴长度。经检影验光及测定眼轴长度后,深度麻醉处死动物,摘除眼球,取后极部视网膜、脉络膜及巩膜,光镜下对比观察离焦型近视眼和对照眼视网膜的形态学变化;采用免疫组织化学法和Western blot技术检测视网膜中光感受器间维生素A类结合蛋白(IRBP)和视网膜、脉络膜及巩膜中视黄酸核受体β(RAR-β)的蛋白质的表达变化;用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)法检测视网膜中IRBP及视网膜、脉络膜和巩膜中RAR-β的mRNA表达变化;应用高效液相色谱法(HPLC)检测视网膜、脉络膜和巩膜中的视黄酸(RA)含量。结果与自身对照眼及空白对照组相比较,Ⅰ组和Ⅱ组离焦眼形成明显的近视眼、眼轴延长(P0.05),离焦Ⅱ组近视程度重于Ⅰ组(P0.05)。视网膜HE染色及厚度测量可见,Ⅰ组和Ⅱ组离焦眼视网膜有核细胞数减少,视网膜变薄(P0.05),但Ⅱ组离焦眼视网膜全层厚度及视网膜各层形态学改变与Ⅰ组离焦眼相比较差异无统计学意义(P0.05)。与空白对照组和离焦组左眼相比,Ⅰ组和Ⅱ组右眼视网膜的IRBP蛋白及mRNA表达明显降低(P0.05),Ⅱ组IRBP mRNA的表达量显著低于Ⅰ组(P0.05)。与空白对照组和离焦组左眼相比,RAR-β蛋白及mRNA表达量在Ⅰ组和Ⅱ组右眼视网膜中明显增高(P0.05),且离焦Ⅱ组比Ⅰ组RAR-β表达强(P0.05);而在Ⅰ组和Ⅱ组右眼脉络膜及巩膜中明显下降(P0.05),且Ⅱ组比Ⅰ组表达少(P0.05)。视黄酸(RA)含量在离焦Ⅰ组和Ⅱ组视网膜、脉络膜和巩膜中均升高(P0.05),Ⅰ组右眼视网膜、脉络膜及巩膜平均RA含量与Ⅱ组相比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 1.幼龄豚鼠配戴-10D自制凹透镜可诱导形成明显的近视眼,配戴以kt板为镜框的自制近视镜可作为一种有效的离焦方法。 2.视黄酸(RA)在豚鼠视网膜、脉络膜及巩膜中均有表达,其中脉络膜含量最高。镜片离焦所致视环境改变后,视网膜、脉络膜及巩膜中的RA表达升高,提示RA参与了豚鼠离焦型近视的形成。 3.视黄酸受体β的表达在离焦型近视眼视网膜中增高,而在脉络膜及巩膜中下降,RAR-β的变化方向与近视程度发展一致,提示RAR-β可能参与了离焦型近视眼的形成和发展,RAR-β在离焦型近视眼中的作用机制与形觉剥夺型近视眼不同,可能与中枢调节有关。 4.视黄酸转运载体光感受器间维生素A类结合蛋白(IRBP)在离焦型近视眼视网膜中的表达减少,说明IRBP可能参与离焦型近视眼的发生发展,IRBP可能通过视觉中枢途径参与近视的形成。
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【学位授予单位】：辽宁医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R778.11

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