外源性褪黑素对豚鼠形觉剥夺性近视中褪黑素受体、iNOS、c-fos表达的影响

发布时间：2018-11-21 07:09

【摘要】：近视是一种常见的屈光不正,并有引发病理性改变的风险。包括人在内的大多数动物出生时是处于远视状态的,在生长过程中逐渐形成正视。这个过程是需要依赖视觉的。如果此过程中缺乏早期的视觉经历,则很可能会导致眼球的发育异常,最终导致近视的形成。形觉剥夺性近视(form deprivation myopia, FDM)是指用人为的方法比如缝合眼睑、戴弥散镜片或半透明眼罩来改变实验动物的视觉经历,造成实验动物屈光度及眼轴长度发生改变从而引起近视的一种实验方法。Wiesel于1977年用缝合恒河猴眼睑的方法首次成功诱导出形觉剥夺性近视,此后近视动物模型建立的方法在不断的发展与完善。已有的研究表明,形觉剥夺性近视是一种涉及多种介质与因子改变的复杂的过程。新近的研究将重点越来越聚焦于视网膜上各种神经介质的功能和变化,这些神经介质中,褪黑素(melatonin, MLT)逐渐受到人们的关注。 褪黑素是一种神经内分泌激素,化学名为N-乙酰-5-甲氧色胺,由5-羟色胺转化而来。因发现进入蛙黑色素细胞后会使蛙全身的肽色变浅而得名。在生理状况下,人及其它哺乳动物、鸟类体内褪黑素主要来源于松果体。但有些松果体外组织也能合成少量,例如视网膜、肠、副泪腺等。松果体内分泌褪黑素呈24小时规律性波动,表现为夜间分泌增加而白天分泌减少,其分泌节律由交叉上核团(SCN)根据昼夜节律来控制。 褪黑素在动物体内发挥各种生理作用需要通过褪黑素受体的介导来完成。二十世纪末召开了国际药理学联合会会议,在此次会议上MLT受体被分为3种亚型,分别为MT1、MT2、MT3;人眼部视网膜及其外大部分眼部组织中存在MT1、MT2。MLT不仅具有清除氢氧自由基的能力,而且可以抑制体内一氧化氮(NO)过度生成,对损伤和炎症有保护作用。c-fos是一种原癌基因,属于即刻-早期基因类。本实验在建立豚鼠形觉剥夺性近视模型的同时,给予不同剂量外源性MLT干预。观察各组眼屈光度、眼轴长度、及视网膜MT1、iNOS及c-fos的变化,推测外源性MLT在FDM形成中的作用。 材料与方法 选用出生后7天的雄性健康花色豚鼠40只,复方托品酰胺眼液滴眼后检影验光,排除先天性近视及其它眼疾。用半透明眼罩遮盖豚鼠右眼,左眼为对照眼,建立FDM模型。将40只豚鼠随机分为4组,每组10只。A组为对照组,经腹腔注射生理盐水5 ml·kg-1,B、C、D组分别经腹腔注射外源性MLT5 mg·kg-1、10 mg-kg-1、20 mg·kg-1,隔日一次,连续注射8周。实验进行8周后,用A超测量豚鼠双眼眼轴长度,用检影验光法检测双眼屈光度数,用免疫组织化学染色法检测豚鼠双眼视网膜上褪黑素受体MT1、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和c-fos的表达水平。采集相应的视网膜切片图像,用Image-Pro Plus 6.0图像分析软件进行分析,用平均光密度值来表示以上指标的表达强度。 所有的实验数据用x±s表示,数据的统计学分析采用SPSS 17.0统计软件包,首先进行方差齐性检验,然后再行单因素方差分析及LSD-t检验,以α=0.05作为检验水准。P0.05为差异有统计学意义。 结果 1.A组遮盖眼屈光度数、眼轴长度、视网膜中iNOS、MT1、c-fos平均光密度值表达分别为：(-7.86±0.26)D、(8.51±0.16)mm、(0.4836±0.0247)、(0.3179±0.0344)、(0.2282±0.0246),与对照眼相比遮盖眼近视屈光度增加,眼轴增长,视网膜中iNOS免疫活性增加而MT1、c-fos活性降低(P0.05)。FDM模型建立成功。 2.不同剂量MLT作用于FDM,随外源性MLT剂量的增加,与A组相比,以上指标变化被明显抑制甚至逆转：C组和D组FDM眼的屈光度数、眼轴长度、视网膜中iNOS、MT1、c-fos平均光密度值表达分别为：(-4.30±0.59)和(-3.41±0.88)D、(8.04±0.24)和(7.43±0.39)mm、(0.3733±0.0427)和(0.3079±0.1261)、(0.3743±0.0447)和(0.4055±0.0919)、(0.3713±0.0786)和(0.4458±0.0974)。C组和D组与A组比较有显著性差异(P0.05),差异有统计学意义；但B组与A组之间的差异无显著性(P0.05)。 结论 1.8周后遮盖眼近视屈光度数增加,眼轴延长,成功建立FDM模型。 2.豚鼠遮盖眼视网膜中iNOS表达明显增多,MT1、c-fos表达明显减少,提示iNOS、MT1及c-fos可能参与了近视的形成。 3.外源性MLT能抑制甚至逆转FDM中屈光度、眼轴长度、iNOS、MT1、c-fos免疫活性。 4.外源性MLT高剂量组上述检测结果的抑制趋势较低剂量组明显。据此可推测外源性MLT对FDM的形成有抑制作用。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R778.11

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本文编号：2346270