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屋尘螨特异性免疫治疗抑制IgE易化变应原结合的检测方法的建立和验证

发布时间:2019-03-24 15:53
【摘要】:特异性免疫治疗用于治疗变应性鼻炎已在很多地方得以开展,并获得良好的临床效果。特异性免疫治疗可诱导机体发生一系列免疫学改变,包括抗体反应和细胞反应,其中血清特异性IgG4被认为是特异性免疫治疗诱导产生的抑制性 封闭抗体‖的主要成分。但是,任何单一的免疫学产物表达水平的检测都不能令人信服地解释特异性免疫治疗所带来的临床改善,亟需找到一种综合反映特异性免疫治疗诱导的血清抗体抑制功能的生物学标记。 IgE易化变应原提呈(IgE-facilitated allergen presentation, FAP)涉及到变态反应发生的多个环节和方面,而特异性免疫治疗能够抑制这一过程。其体外实验可以简化为IgE易化变应原结合(IgE-facilitated allergen binding, FAB)实验,后者可被一种基于流式细胞术的简单方法检测到。变应原与含高浓度特异性IgE的血清共同孵育,形成变应原-IgE复合物,再经Fc段与EB病毒转化的B细胞的表面IgE低亲和力受体结合后,即可被流式细胞术检测到。加入特异性免疫治疗后血清,变应原-IgE复合物的形成及其后与B细胞的结合受到抑制,在流式细胞术中则表现为结合有复合物的B细胞百分率下降,即特异性免疫后血清治疗可以抑制FAB,而且,,这种抑制程度与特异性免疫治疗所导致的临床改善程度直接相关,使得特异性免疫治疗后血清对FAB的抑制活性成为提示特异性免疫治疗临床疗效的良好生物标记。 本研究严格按照International Conference on Harmonisation (ICH)的实验方法学建立指南,对屋尘螨特异性免疫治疗抑制IgE易化变应原结合的检测方法进行了标准化和临床应用验证。分析发现该检测方法有着较小的批内和批间变异,重复性好,同时有着良好的敏感度、线性度和稳健性,临床敏感性和特异性高,是一种监测特异性免疫血清抑制活性的良好生物学标记,对提示特异性免疫性治疗效果有着重要指导意义。
[Abstract]:Specific immunotherapy for allergic rhinitis has been carried out in many places, and good clinical results have been obtained. Specific immunotherapy can induce a series of immunological changes, including antibody reaction and cell reaction, in which serum specific IgG4 is considered to be the main component of inhibitory blocking antibody induced by specific immunotherapy. However, the detection of the expression level of any single immunological product does not provide a convincing explanation for the clinical improvement brought about by specific immunotherapy. It is urgent to find a biological marker which comprehensively reflects the inhibition of serum antibody induced by specific immunotherapy. IgE facilitated allergen presentation (IgE-facilitated allergen presentation, FAP) involves many links and aspects of the occurrence of allergic reactions, and specific immunotherapy can inhibit this process. The in vitro assay can be reduced to IgE facilitated allergen binding (IgE-facilitated allergen binding, FAB), which can be detected by a simple flow cytometry method. Allergens were incubated with serum containing high concentration of specific IgE to form allergen-IgE complex. After binding to the low affinity receptor of IgE on the surface of B cells transformed by EB virus, the allergen-IgE complex could be detected by flow cytometry. After the addition of specific immunotherapy, the formation of allergen-IgE complex and its subsequent binding to B cells were inhibited, while the percentage of B cells bound to B cells decreased in flow cytometry. That is, after specific immunotherapy, serum therapy can inhibit FAB, and the degree of inhibition is directly related to the degree of clinical improvement caused by specific immunotherapy. The inhibitory activity of serum against FAB after specific immunotherapy became a good biomarker to indicate the clinical effect of specific immunotherapy. In this study, in accordance with the guidelines of International Conference on Harmonisation (ICH) 's experimental methodology, a standardized and clinical test for the detection of IgE facilitation allergens in house dust mite-specific immunotherapy was carried out. It was found that the detection method had small intra-and inter-assay variation, good repeatability, good sensitivity, linearity and robustness, and high clinical sensitivity and specificity. It is a good biological marker to monitor the specific immune serum inhibitory activity, and it has important guiding significance to indicate the effect of specific immune therapy.
【学位授予单位】:华中科技大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R765.21

【共引文献】

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本文编号:2446467

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