ω-3不饱和脂肪酸对视网膜新生血管作用的实验研究

发布时间：2019-04-04 14:07

【摘要】：目的：研究ω-3不饱和脂肪酸对鼠视网膜新生血管的作用。 方法：选取出生后7日健康清洁级新生Wistar白鼠32只,雌雄不限,分为A、B、C、D4组,每组各8只,分别与母鼠共同饲养,四组实验鼠在空气中喂养5日后将12日龄鼠与母鼠取出,均置于氧气含量为75%±2%的密闭孵育箱中,每天将母鼠取出1次,每次正常环境中饲养3小时,5日后将12日龄小鼠取出,放置空气中喂养至17日龄,即制备出新生鼠早产儿视网膜病变动物模型。其中A组为ROP模型对照组,B、C、D组分别小剂量治疗组、中剂量治疗组及大剂量治疗组,分别给予不同剂量ω-3PUFAs喂养,按母鼠公斤体重给与co-3PUFAs 2.5mg/kg/d、7.5mg/kg/d及15mg/kg/d喂养。手术显微镜下摘除小鼠视网膜,采用免疫组化观察小鼠中突破视网膜内界膜CD31的特异性表达,Western印迹法检测视网膜标本中RGS5的表达。 结果：免疫组化观察各组样本鼠新生血管内皮细胞核突破视网膜内界膜数,A组突破视网膜内界膜的新生血管内皮细胞核数为(17.00±3.42)个、B组突破视网膜内界膜的新生血管内皮细胞核数为(15.63±2.67)个、C组突破视网膜内界膜的新生血管内皮细胞核数为(9.13±1.96)个、D组突破视网膜内界膜的新生血管内皮细胞核数为(8.38±2.19)个；其中模型组突破视网膜内界膜的新生血管内皮细胞核数高于ω-3PUFAs喂养组,小剂量ω-3PUFAs喂养组突破视网膜内界膜的新生血管内皮细胞核数高于大剂量co-3PUFAs喂养组。A组与C组、A组与D组比较差异均有显著意义((P0.001),其中A、B组相比较；C、D组相比较差异无显著意义(P0.05)。 免疫印迹法检测各实验组视网膜RGS5的表达：A组RGS5/β-Actin值为(0.24±0.96)、B组RGS5/β-Actin值为(0.36±0.08)、C组RGS5/β-Actin值为(0.51±0.23)、D组RGS5/β-Actin值为(0.66±0.19)。其中模型组RGS5/β-Actin值低于ω-3PUFAs喂养组,小剂量RGS5/β-Actin值低于中剂量ω-3PUFAs喂养组,中剂量ω-3PUFAs喂养组略低于高剂量ω-3PUFAs喂养组,A组与C组、A组与D组比较差异均有显著意义((P0.001),其中A、B组相比较；C、D组相比较差异无显著意义(P0.05)。 结论：RGS5表达并介导鼠视网膜新生血管疾病的病理过程,方差分析显示给予一定剂量的ω-3不饱和脂肪酸对于RGS5有调节作用,并参与对视网膜新生血管的调节。
[Abstract]:Aim: to study the effects of omega-3 unsaturated fatty acids on retinal neovascularization in rats. Methods: thirty-two healthy and clean newborn Wistar rats were divided into A, B, C, D4 groups (8 rats in each group) and fed with female rats, respectively, on the 7th day after birth, and were divided into three groups: group A, group B, group C and group D 4, 8 rats in each group. After being fed in the air for 5 days, the 12-day-old mice and the female rats were taken out in a sealed incubator containing 75% 卤2% oxygen, and the female rats were taken out once a day for 3 hours in the normal environment. After 5 days, the 12-day-old mice were taken out and fed into the air until 17 days old, so as to establish the animal model of retinopathy of preterm infant in newborn mice. Group A was ROP model control group, group B, C, D were treated with low dose, middle dose and high dose respectively. The rats were fed with 蠅-3PUFAs at different doses, and given 2.5 mg / kg co-3PUFAs according to the body weight of the female rats, and the mice were fed with co-3PUFAs 2.5 mg / kg / kg, respectively. 7.5mg/kg/d and 15mg/kg/d were fed. The specific expression of CD31 in the inner limiting membrane of mouse retina was observed by immunohistochemistry, and the expression of RGS5 in retinal specimens was detected by Western blot. Results: the number of neovascularized endothelial nuclei breaking through the inner limiting membrane of retina in each group was observed by immunohistochemistry. The number of neovascularized endothelial cells in group A was (17.00 卤3.42), and the number of nucleus of neovascularized endothelial cells in group A was (17.00 卤3.42). The number of neovascularized endothelial nuclei in group B and group C were (15.63 卤2.67) and (9.13 卤1.96), respectively, and those in group C were (9.13 卤1.96) and (9.13 卤1.96), respectively, and that in group B and C were (15.63 卤2.67) and (9.13 卤1.96), respectively. In group D, the number of neovascularized endothelial cells breaking through the inner limiting membrane of retina was (8.38 卤2.19). The number of neovascularized endothelial nuclei in the model group was higher than that in the 蠅-3PUFAs feeding group, which broke through the inner limiting membrane of retina. The number of neovascularized endothelial nuclei in the low-dose 蠅-3PUFAs feeding group was higher than that in the high-dose 蠅-co-3PUFAs feeding group. There was significant difference in the number of neovascularization nuclei between group A, group C, group A and group D (P0.001), in which A, and D were significantly higher than those in group A (P0.001). Group B was compared; There was no significant difference in C, D group (P0.05). The expression of RGS5 in retina of each experimental group was detected by immunoblotting: the value of RGS5/ 尾-actin in group A was (0.24 卤0.96), B) and the value of RGS5/ 尾-actin was (0.51 卤0.23) in group A (0.36 卤0.08), C). The value of RGS5/ 尾-actin in group D was (0.66 卤0.19). The value of RGS5/ 尾-actin in model group was lower than that in 蠅-3PUFAs feeding group, that in low-dose RGS5/ 尾-actin group was lower than that in mid-dose 蠅-3PUFAs feeding group, in middle-dose 蠅-3PUFAs feeding group was slightly lower than that in high-dose 蠅-3PUFAs feeding group, and that in groups A and C was lower than that in high-dose 蠅-3PUFAs feeding group. There was significant difference between group A and group D (P0.001), in which group A and group B were compared. There was no significant difference in C, D group (P0.05). Conclusion: the pathological process of retinal neovascularization was induced by the expression of RGS5. Variance analysis showed that 蠅-3 unsaturated fatty acids could regulate RGS5 and participate in the regulation of retinal neovascularization.
【学位授予单位】：石河子大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R774.1

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本文编号：2453893