大鼠晶状体损伤促进视神经损伤后视网膜神经节细胞存活机制的研究

发布时间：2019-12-04 23:44

【摘要】： 外伤性视神经病变(Traumatic optic neuropathy, TON)是眼眶、颅脑及面部外伤的严重并发症,往往导致不可治愈的原发性或继发性盲目。长期以来,关于外伤性视神经病变的治疗一直存在着争议。理论上讲,最终解决这一问题的唯一途径就是使受损的视神经重新再生。视网膜神经节细胞(Retina ganglion cells, RGCs)的存活和其轴突再生有着密切的关系,因此对于视神经损伤后如何保护和挽救RGCs存活和促进其轴突再生已成为当前国内外研究的热点。近年来,Leon和Fischer等研究发现,大鼠晶状体的损伤能极大地促进视神经损伤后RGCs的存活及大量轴突再生通过视神经断端。已有研究证实鼠类视网膜内Muller细胞提取液(Murine Muller cells conditioned medium, MMG)可促进离体培养的视网膜神经节细胞存活及轴突的生长,但是晶状体损伤能否会使视神经损伤大鼠的视网膜中Muller细胞的表达发生变化一直鲜见报道。本实验采用动物实验的方法进行这方面的研究。目的研究Muller细胞在晶状体损伤促进视神经横断伤后RGCs存活中的变化及作用。方法选用健康成年Wistar大鼠作为实验动物,共40只。随机分为3组：正常对照组8只,单纯损伤组16只,联合损伤组16只。正常对照组大鼠饲养7天后处死,其余2组分别在术后7天和14天各处死相应的大鼠8只。HE染色观察视网膜组织形态学的变化,通过免疫组化方法用神经胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)标记视网膜内Muller细胞,显微镜下观察各组大鼠各时间点视网膜内RGCs数量及GFAP阳性Muller细胞表达变化。结果 1.正常大鼠视网膜各层次清晰,神经纤维层排列规则,RGCs大多为单层排列,细胞间无炎症细胞,细胞计数为52.98±1.90。术后第7天,单纯损伤组存活RGCs数为36.61±1.69,其丢失率为30.90%；联合损伤组存活RGCs数为50.76±2.77,其丢失率为4.19%；3组中存活RGCs数量两两比较,除正常对照组和联合损伤组间差异无统计学意义(P=0.053)外,其余两两比较差异均有统计学意义(P=0.000)。术后第14天,单纯损伤组存活RGCs数为22.67±1.94,其丢失率为57.22%；联合损伤组存活RGCs数为35.69±1.80,其丢失率为32.62%；3组中存活RGCs数量两两比较,差异均有统计学意义(P=0.000)。 2.正常组视网膜中,Muller细胞胞体所在的内核层GFAP着色不明显,神经纤维层见浅棕色斑点状着色,RGCs的胞膜着色不明显,内丛状层可见少量与视网膜垂直的细丝状浅棕色着色。术后第7天,单纯损伤组视网膜内核层可见阳性细胞,阳性细胞数为29.38±2.04,呈浅棕色,可见胞体和突起的肥大。神经纤维层及RGCs胞膜亦可见斑点状着色,内丛状层、外丛状层、外核层及色素细胞层亦可见GFAP阳性着色。术后第7天,联合损伤组视网膜内核层中阳性细胞数为48.96±2.80,呈深棕色,且伴有阳性细胞胞体和突起的肥大。单纯损伤组和联合损伤组阳性细胞数差异有统计学意义(P=0.000)。术后第14天,单纯损伤组视网膜内阳性细胞数为19.07±2.14,但未见胞体和突起的肥大。较同组7天时阳性细胞数量下降,差异有统计学意义(P=0.000)。联合损伤组术后第14天阳性细胞数为46.73±1.50,与同组第7天相比,差异无统计学意义(P=0.067),且都伴有阳性细胞胞体和突起的肥大。术后第14天,单纯损伤组和联合损伤组阳性细胞数差异亦有统计学意义(P=0.000)。结论 1.视神经横断伤后,随着时间的推移RGCs进行性丢失。 2.晶状体损伤可显著促进视神经横断伤后RGCs的存活,且这种保护作用在损伤的早期更强。 3.晶状体损伤可显著促进视神经损伤后视网膜内Muller细胞GFAP的活化,且活化状态稳定。
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R774

【引证文献】