球周注射尼莫地平对兔视网膜神经节细胞的凋亡和Bcl-2、Bax的影响

发布时间：2020-06-10 19:58

【摘要】：目的观察眼球周注射尼莫地平对兔慢性高眼压视网膜视神经节细胞的凋亡和Bcl-2、Bax表达的影响,以及对眶内组织损伤的形态学观察。方法选用新西兰健康雄性大耳朵白兔54只,随机分为正常对照组(A组)6只,实验组48只。正常对照(A组)不做任何处理,给予常规饲养,一般条件与实验组均相同管理。实验组均在局麻下行前房注射复方卡波姆的方法,制造兔慢性高眼压模型,均以右眼为实验眼,连续监测眼压均高于21.97mm Hg,且无手术并发症的视为造模成功。实验组随机分为4个亚组(B、C、D、E组),B组给予眼球局部注射等量生理盐水,C、D、E组给予注射低(0.125 mg)、中(0.25mg)、高(0.5 mg)剂量尼莫地平注射液,每日一次。分别于第2、4w处死动物,摘取眼球及眶内组织,经多聚甲醛固定,常规行石蜡包埋、切片。视网膜组织行免疫组化法检测Bcl-2和Bax表达,TUNEL法检测视网膜神经节的细胞凋亡指数。眶内组织行HE染色、Masson染色、VG染色,进行形态学观察,免疫组化法检测Bcl-2和Bax阳性因子表达,采用Image-Pro Plus 6.0光密度分析软件,测平均光密度值。所得数据采用统计软件分析包SPSS 17.0进行分析,比较各组之间的差异情况。结果视网膜组织HE染色可见模型组视网膜神经节细胞水肿,细胞核固缩,新月形核。测量内侧视网膜厚度,统计发现在2w和4w时B组厚度均低于C、D、E组(P0.05),其中D、E两组之间比较差异无统计学意义P0.05。视网膜神经细胞Bcl-2的表达在2w和4w时C、D、E三组均高于模型B组(P0.05),在C、D、E三组中,D、E两组高于C组(P0.05),组内比较C、D、E三组4w表达量高于2w(P0.05)。视网膜神经细胞Bax的表达在模型B组Bax表达在2w和4w两个时间B组均高于C、D、E三组(P0.05),在C、D、E三组中,C组表达量高于D、E两组(P0.05),而D、E两组之间比较(P0.05),组内比较C、D、E三组4w表达量高于2w(P0.05)。Bcl-2与Bax比值显示D、E两组均高于B、C两组(P0.05),且D、E两组之间比较差异无统计学意义(P0.05)。视网膜神经节细胞TUNEL检测法显示,在2w和4w B组凋亡指数均明显高于C、D、E组(P0.05),在C、D、E三组中,C组表达高于D、E两组(P0.05),D、E两组之间比较在2w时无明显差异(P0.05),而在4w时差异有统计学意义(P0.05)。眶内组织形态学观察示:球周注射部位眶内软组织可见胶原纤维增生。检测眼外肌Bcl-2平均光密度值,B、C、D、E组明显高于正常组(P0.05),而四组之间比较无明显差异(P0.05)。检测眼外肌Bax平均光密度值B、C、D、E组表达明显高于正常组(P0.05),而四组之间比较无明显差异(P0.05)。结论球周注射尼莫地平能够上调兔慢性高眼压RGC的Bcl-2表达和下调Bax表达,维持RGC的正常形态,抑制RGC凋亡指数。球周注射可引起眼外肌组织炎性反应、胶原纤维增生,以及上调Bcl-2表达、下调Bax表达。中、高剂量尼莫地平效果更显著。
【图文】：

视图,HE染色,内界膜,神经纤维层

网膜神经纤维层；IPL 内丛状层；INL：内核层；ONL）；ILM：内界膜；MLM：中界膜；黑色竖线：内侧视图 2 正常组 HE 染色（×400）Fig.2 Normal group HE(×400)： 2w：RGC 及 RNFL 出现明显的异常

尼莫地平,视网膜,固缩,胞核

图 3 模型组 2w HE 染色（×400）图 4 模型组 4w HE 染色（×400）Fig.3 Model group 2w HE(×400) Fig.4 Model group 4w HE(×400)尼莫地平组视网膜形态，在 2w：RGC 与 RNFL 异常程度较模型 B 组 2w 轻，可见少量胞核固缩。B 组与 D、E 两组内侧视网膜厚度比较（P<0.05），而 C 组与
【学位授予单位】：华北理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R775

【参考文献】