第二代杂交捕获法与多重荧光PCR在口咽癌中对高危型HPV的检测比较

发布时间：2020-06-22 09:01

【摘要】：目的:本文旨在通过对比第二代杂交捕获法(HC2)和多重荧光聚合酶链反应(PCR)在口咽鳞癌患者中对高危型人乳头状瘤病毒(HPV)的检测结果,比较两种检测方法的优缺点并验证HC2技术对高危型HPV检测的可行性。方法:2015年1月至2016年9月间,在青岛大学医学院附属医院耳鼻咽喉头颈外科及口腔颌面外科就诊的经病理证实的口咽鳞状细胞癌31例。采用HC2和多重荧光PCR检测31例口咽癌患者中高危型HPV感染情况,并应用SPSS17.0统计软件对其结果进行分析。通过对比两种实验方法测得的结果计算一致性指数(Kappa指数),如Kappa指数在0.4-0.75之间说明一致性好,如Kappa指数≥0.75说明一致性极好。结果:31例标本中通过HC2检测出高危型HPV阳性7例,阴性24例,阳性检出率为22.58%,其中有1例阳性患者经PCR检测为阴性。多重荧光PCR检测出高危型HPV阳性8例,阴性23例,阳性检出率为25.81%,其中有2例阳性患者经HC2检测为阴性。31例标本中有6例经2种方法检测为阳性符合,占总检测数的19.35%,22例为阴性符合,占总检测数的70.97%,总符合率为90.32%,总一致性指数(Kappa指数)为0.7364。HC2和多重荧光PCR两种方法检测高危型HPV的一致性较好。结论:本研究的检测结果中,HC2可同时检测到多种高危型HPV亚型,并与多重荧光PCR比较也具有较好的一致性,对于口咽癌患者使用HC2分析高危型HPV的感染结果有可行性,在有严格质量管理的情况下可作为临床口咽癌患者HPV DNA筛查的有效手段。
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R739.63
【图文】：

对高危型 HPV 的检测比较研究内容背景知识1 HPV 分子结构特征及分型HPV 为双链闭合环状结构的 20 面体，自身具有立体对称的形状，属于乳多泡病毒科 A 亚群内的一组 DNA 病毒，此 DNA 病毒直径约 55nm，无包膜，颗衣壳蛋白和核酸构成（图 1）。HPV 的双链闭环基因组分早期区（Early region）、晚期区（Laterregion，L)和长控区（Long control region，LCR）。E 区主要码病毒与其和宿主细胞转化的 El、E2、E4、E5、E6、E7 等早期蛋白[12]，其 E7 是主要的致癌区，负责参与病毒 DNA 的复制、转录、翻译、调控、以及宿主的转化；L 区负责对病毒的主要衣壳蛋白 L1 和次要衣蛋白 L2 的编码；LCR 则担调控病毒 DNA 的复制和转录功能[13]。

青岛大学硕士学位论文结 果1 口咽癌患者中的 HPV 感染率及亚型分布31 例标本行多重荧光 PCR 检测提示 HPV 阳性者 8 例，感染率为 25.81%，其亚型分类为：HPV-16（5 例）、HPV-18（2 例）、HPV-31（1 例）。其中 HPV 阳性患者中 HPV-16 的感染率为 62.5%（图 2）；HVP-18 的感染率为 25%；HPV-31 感染率为 12.5%（表 2）。

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本文编号：2725503