大鼠糖尿病视网膜病变模型研究中眼底造影技术的改进

发布时间：2020-07-04 10:09

【摘要】：研究背景糖尿病视网膜病变(Diabetic retiopathy, DR)位居不可逆致盲性眼底病的首位,大鼠模型广泛应用于防治DR的药物、基因实验中。以往的研究证实,大鼠DR的典型病理改变为视网膜血管渗漏、周细胞减少、毛细血管闭塞等特征,准确高效地观察到这些改变,无疑对理解DR、高效合理地应用本模型有着重要意义。但目前用无色素大鼠(如Sprague Dawley大鼠、Wister大鼠等)制作的DR模型,在活体大鼠体内使用眼眼底荧光造影检查时,看不到清晰的视网膜血管渗漏等大体病理特征；另外,使用临床常用的眼底造影设备HRA-II,需要耗费大量的时间调整眼位且尾静脉注射造影剂困难。目的建立一种新的眼底血管造影(Fundus Fluorescence Angiography,FFA)技术,Micron-III小动物成像仪联合腹腔注射造影剂检查有色素(Brown Norway RatBN)大鼠诱导的糖尿病模型,获得清晰的视网膜血管病理图像,为DR防治奠定基础。方法 ①健康BN大鼠和(Sprague Dawley Rat)SD大鼠(体重200-250g)各15只,尾静脉一次性注射55mg/Kg链脲佐菌素(STZ),制作I型大鼠糖尿病模型。造模后,每周鼠尾断端采血检测血糖,8周后,血糖值稳定于16.7mmol/1-27.8mmol/1的大鼠各10只纳入研究；②以右眼为实验眼,裂隙灯照相观察2组动物的眼前节变化；③Micron-Ⅲ小动物眼底成像系统联合腹腔注射荧光素钠造影剂,行眼底照相和FFA检查,记录2组动物的眼底情况；④2组大鼠各取3只,制作视网膜血管消化铺片,过碘酸雪夫(Periodic Acid SchiffStain,PAS)常规染色,显微镜下观察血管的形态学改变；⑤对眼底造影图像清晰的大鼠,3日后,使用目前的技术“海德堡眼底造影仪HRA-II联合尾静脉注射造影剂”进行再次检查,比较2种不同造影技术所需要的准备时间及图像差异。结果 ①8周后,10只BN大鼠和10只SD大鼠符合血糖标准,纳入研究。2组动物血糖数值无明显差异(P0.05)；②BN组5只出现白内障(5/10)，SD组6只出现白内障(6/10),无明显差异(P0.05)；③在棕褐色背景下,BN组视网膜血管显影清晰,无脉络膜背景荧光干扰,10只动物FFA出现了血管迂曲、无灌注区、血管渗漏等典型糖尿病样改变(10/10),而SD组由于迅速的脉络膜背景荧光干扰,视网膜血管显影不清晰,未见典型糖尿病样改变(0/10),2组有显著性差异(P0.05)。④2组动物视网膜血管铺片上可发现典型的DR形态学变化(6/6vs.6/6),如血管迂曲成袢,无细胞毛细血管等,无明显差异(P0.05)；⑤使用Micron-Ⅲ小动物眼底成像系统联合腹腔注射荧光素钠造影剂可迅速开展造影,平均准备时间57.50±8.17s(n=7),而采用传统的海德堡眼底造影仪HRA-Ⅱ和尾静脉注射造影剂,准备时间则需320.34±38.79s(n＝7),差异有统计学意义(p0.05),新方法平均节省260s。2组FFA图像无显著性差异,仅为注射荧光素钠后眼底显影时间略有不同。尾静脉注射后3-5s眼底开始荧光显影,而腹腔注射后,需要腹膜吸收再入血存在着5s左右的时间滞后性,导致早期相不太清楚,但是中期相动脉与静脉显影清晰度和持续时间比较理想。结论 Micron-Ⅲ视网膜影像系统联合腹腔注射荧光素钠是一种简易有效的大鼠眼底检查技术；BN大鼠眼底有棕褐色色素,其暗房效应使得眼底照相、FFA效果明显优于SD大鼠。此两个技术改进,简便、清晰地获得了糖尿病大鼠视网膜血管的造影结果,为促进DR的防治研究奠定了技术基础。
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R587.2;R774.1

【参考文献】