塞来昔布联合甘氨双唑钠对鼻咽癌CNE-2细胞放疗增敏作用的研究

发布时间：2020-07-15 17:23

【摘要】：目的:研究塞来昔布对人鼻咽癌CNE-2细胞的放射增敏作用及与甘氨双唑钠联合应用的协同效应,并初步探讨其可能的作用机制。方法:1.四唑盐比色法(MTT)法检测不同浓度塞来昔布、甘氨双唑钠对CNE-2细胞的增殖抑制作用,绘制增殖抑制曲线,确定塞来昔布和甘氨双唑钠最适工作浓度。2.克隆形成实验分为单纯照射组(IR)、塞来昔布+放疗组(C+R)、甘氨双唑钠+放疗组(G+R)、塞来昔布+甘氨双唑钠+放疗组(C+G+R)。通过计算各组存活分数(SF),构建单击多靶模型拟合细胞存活曲线,计算放射增敏比(SER),检测塞来昔布联合甘氨双唑钠对CNE-2细胞放射敏感性的变化。3.流式细胞仪(FCM)分析塞来昔布联合甘氨双唑钠处理鼻咽癌CNE-2细胞,经放疗后,细胞周期分布及凋亡率变化。结果:1.不同浓度塞来昔布处理CNE-2细胞24h及48h后,显示塞来昔布抑制CNE-2细胞的增殖,呈现明显的时间及剂量依赖性(P0.01)。24h、48h塞来昔布IC50值分别为63.01μg/m L、61.79μg/m L,选择低于IC50值2个浓度梯度20μg/m L作为最适工作浓度。而不同浓度甘氨双唑钠处理CNE-2细胞24h及48h后,显示甘氨双唑钠对CNE-2细胞无明显增殖抑制作用(P0.05),根据相关文献,选择浓度25μg/m L作为最适工作浓度。2.在不同剂量0、2、4、6Gy照射范围内,(C+R)组、(G+R)组SF值均低于IR组(P0.01),SF值随放疗剂量的增加而降低;(C+G+R)组SF值均低于IR组、(C+R)组、(G+R)组(P0.01),SF值随放疗剂量的增加而降低。IR组、(C+R)组、(G+R)组、(C+G+R)组D0依次为4.45、3.98、4.10和2.60,相对于IR组,(C+R)组、(G+R)组、(C+G+R)组的SER依次为1.12、1.09和1.71。3.细胞周期实验提示,(C+R)组、(G+R)组、(C+G+R)组处理CNE-2细胞后,较IR组相比,G0/G1期比例增高(P0.01),S期比例减少(P0.01)。细胞凋亡实验提示,(C+R)组、(G+R)组、(C+G+R)组处理CNE-2细胞后,较IR组相比,CNE-2细胞凋亡率升高(P0.01);而(C+G+R)组较(C+R)组、(G+R)组相比,凋亡率升高更明显(P0.01)。结论:1.塞来昔布对CNE-2细胞增殖有明显抑制作用,且呈时间、剂量依赖性;甘氨双唑钠对CNE-2细胞增殖没有明显抑制作用。2.塞来昔布、甘氨双唑钠增加CNE-2细胞的放射敏感性,两药联合具有协同增敏作用。3.塞来昔布、甘氨双唑钠及两药联合增加CNE-2细胞放疗敏感性的机制可能是通过诱导CNE-2细胞周期阻滞,阻碍细胞DNA的合成而导致细胞凋亡。
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R739.63

【参考文献】