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缺氧状态下的人视网膜色素上皮细胞中音猥因子信号通路与血管内皮生长因子表达的关系

发布时间:2020-07-21 11:25
【摘要】:目的观察研究缺氧状态下,人视网膜色素上皮(hRPE)细胞(ARPE-19)中音猥因子(Shh)与血管内皮生长因子(VEGF)的表达关系。方法传代培养hRPE细胞,取对数生长期3~6代细胞用于实验。将hRPE细胞分为正常对照组、缺氧实验组及环巴明抑制组。缺氧组加入100 μmol/LCoC12,环巴明抑制组于制作缺氧状态前lh加入20 μmol/L的环巴明进行预处理。3组细胞培养4、8、12、24 h。采用荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测3组hRPE细胞中Shh、VEGF mRNA表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测3组细胞培养上清液中Shh、VEGF蛋白表达。采用Pearson相关性分析法分析缺氧实验组hRPE细胞中Shh、VEGF mRNA表达与蛋白表达之间的关系。结果正常对照组可见少量Shh、VEGF mRNA及蛋白表达;缺氧实验组Shh、VEGF mRNA及蛋白表达较较正常对照组显著增加,差异有统计学差异(F=178.364 P0.01;F=183.732 P0.01;F= 77.456 P0.01;F=91.572 P0.01;);且较环巴明抑制组明显增加,差异有统计学差异(F值=68.745 P0.01;F=121.834,P0.01)。相关性分析结果显示,缺氧实验组hRPE细胞中VEGF蛋白表达与Shh蛋白表达呈正相关(r= 0.942,P0.05);VEGF mRNA表达与Shh mRNA表达呈正相关(r= 0.970,P0.01)。环巴明抑制组hRPE细胞中VEGF mRNA表达与Shh mRNA表达无相关性(r = 0.915,P0.05)。结论音猬因子(Shh)可能参与了缺氧状态下人视网膜色素上皮细胞中VEGF的表达,且VEGF和Shh的表达呈正相关。
【学位授予单位】:滨州医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:R774.1
【图文】:

曲线,细胞,含量关系,细胞培养


逡逑差异具有统计学意义(P邋<邋0.邋01)。(见表2、图4、图5)逡逑表2细胞培养时间与VEGF、ShhmRNA的表达含量关系逡逑时间(h)逦VEGFmRNA邋(邋x土邋s)逦P逦ShhmRNA邋(邋x士s)逦P逡逑0逦47488.83土3261.444逦0.4110127士邋0.2154逡逑4逦69187.43土邋1629.175逦<0.01逦1.427226士邋0.3917逦<0.01逡逑8逦85769.47±3531.541逦<0.01逦3.368753±0.4301逦<0.01逡逑12逦109249.8±2637.849逦<0.01逦3.612549±0.6669逦<0.01逡逑逦24逦127572.4土5052.027逦<0.01逦5.159705^0.5115逦<0,01逡逑VEGF邋mRNA实验组表达曲线逡逑140000逡逑V邋=邋3263.1x-^邋S&6S8*--逡逑120000邋?逡逑S缅五五义希保埃埃埃埃板澹垮危浚浚垮义襄五五义希福埃埃埃板

本文编号:2764342

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