叔丁基对苯二酚干预STZ诱导型糖尿病大鼠视网膜microRNA的差异表达

发布时间：2020-08-23 12:16

【摘要】：目的:探讨叔丁基对苯二酚(t BHQ)对高脂高糖饮食联合小剂量链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病大鼠视网膜的保护作用,找出t BHQ干预后大鼠视网膜差异表达的mi RNA,通过生物信息技术分析差异mi RNA的作用以寻求t BHQ的潜在保护机制,为DR防治提供新靶点。方法:30只体重100-200g(6-8周龄)的雄性Sprague Dawley大鼠随机分成两组:正常组和造模组,正常组予以标准饲料喂养联合腹腔磷酸盐缓冲液注射,造模组予以高脂高糖饮食喂养联合腹腔小剂量STZ(30 mg·kg-1)注射建立糖尿病大鼠模型,造模成功后进一步分为糖尿病组和t BHQ干预组,3 m后处死各组大鼠。采集大鼠空腹血用于测定生化和胰岛素相关指标,HE染色观察大鼠视网膜各层组织变化,使用mi RNA表达谱芯片测量大鼠视网膜差异性mi RNA,PCR验证特定mi RNA在三组大鼠视网膜的表达水平,分析差异性mi RNA的相关通路,并研究差异性mi RNAs调节的主要生物学功能,讨论差异性mi RNA在糖尿病视网膜发病过程中可能参与的作用。结果:三组大鼠的生化值及视网膜HE染色有明显差异。与正常组大鼠相比,糖尿病组大鼠的空腹血糖值增大,胰岛素减少,差异均有统计学意义(P=0.00)。t BHQ干预组的空腹血糖较正常组显著升高(P=0.00),较糖尿病组相比显著降低(P=0.01),差异均具有统计学意义。t BHQ干预组的血清胰岛素值较正常组减少(P=0.00),较糖尿病组增多(P=0.00),差异均具有统计学意义。HE染色见正常大鼠视网膜表面光滑,各层结构清晰完整,细胞排列整齐。糖尿病大鼠视网膜出现严重的视网膜水肿,细胞核层排列紊乱,结构层不清。在t BHQ干预组中视网膜病理改变轻微。与糖尿病大鼠相比,t BHQ干预组视网膜中mi R-325-3p和mi R-551b-3p上调(1.5倍),mi R-652-3p下调(2.0倍)。通过q RT-PCR的验证,最终选定mi R-325-3p和mi R-551b-3p为差异性mi RNA。结合微阵列实验和生物信息技术对差异性mi RNA进行分析,t BHQ可能通过mi RNA控制的相关差异性靶基因,介导了21个相关信号通路产生保护作用。结论:t BHQ可能通过mi R-325-3p介导的信号通路对2型糖尿病大鼠视网膜起保护作用。
【学位授予单位】：西南医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R587.2;R774.1

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本文编号：2801518