C型凝集素家族基因多态性与BD和VKH综合征遗传易感性的研究

发布时间：2020-10-01 06:10

　　第一部分C型凝集素家族基因多态性与BD的遗传易感性研究背景:白塞氏病(BD)是一种常好发于中青年的累及全身多个器官及系统的自身免疫性疾病。其特点是复发性葡萄膜炎、口腔溃疡、生殖器溃疡和典型的皮肤病变。它常引起中青年的视力严重损害甚至是丧失,给个人,家庭及国家带来了沉重的负担。C型凝集素受体(CLRs)是一大组在免疫细胞中表达的跨膜蛋白,作为为模式识别受体(PRRs),主要通过其表面碳水化合物结构结合病原体发挥重要作用。既往研究显示C型凝集素受体(CLRs)参与了几种自身免疫性疾病得发生,但是CLRs在BD发病中的作用尚不清楚。目的:C型凝集素受体(CLRs)已被证实与几种自身免疫性疾病有关。但是目前为止CLRs在白塞氏病中的作用尚不清楚,因此本研究旨在探讨CLRs基因多态性和白塞氏病的相关性。方法:本研究为两阶段的联合研究,共招募了766名BD患者和1674名健康对照组。用MassARRAY飞行质谱、TaqMan荧光探针和PCR-RFLP酶切分型技术对CLRs家族13个基因的14个SNP进行基因分型。采用Real-time PCR法测定了MBL2和KLRC4 mRNA的表达及ELISA法测定细胞因子的表达。结果:BD患者中,MBL2 rs1800450 A等位基因和AA基因型频率(Pc=2.50×10~(-6),OR=1.494;Pc=2.24×10~(-6),OR=2.899;respectively)和KLRC4/rs2617170 TT基因型频率(Pc=2.53×10~(-6),OR=1.695)较健康人相比显著升高,而MBL2/rs1800450 GG基因型频率(Pc=1.56×10~(-3),OR=0.689)和KLRC4/rs2617170 C等位基因和CC基因型频率与健康人相比显著降低(Pc=2.05×10~(-9),OR=0.664;Pc=1.20×10~(-5),OR=0.585;respectively)。功能研究表明,MBL2/rs1800450 GG基因型mRNA水平显著高于AG基因型(P=0.019)KLRC4/rs2617170 CC基因型的mRNA表达与CT/TT相比显著增加(P0.001);MBL2/rs1800450和KLRC4/rs2617170不同基因型对细胞因子分泌的影响也不同。结论:我们的研究证实了MBL2/rs1800450和KLRC4/rs2617170是中国汉族人群中BD的易感基因。第二部分C型凝集素家族基因多态性与VKH综合征的遗传易感性研究背景:Vogt-Koyanagi-Harada(VKH)综合征是一种双侧肉芽肿性葡萄膜炎,常常伴发假性脑膜刺激征、耳鸣耳聋、脑脊液细胞增多、脱发,皮肤脱色等。T细胞对黑色素细胞产生了错误的自身免疫致敏作用导致了该病的发生。C型凝集素受体(CLRs)是一大组在免疫细胞中表达的跨膜蛋白,作为模式识别受体(PRRs),主要通过其表面碳水化合物结构结合病原体发挥重要作用。既往研究显示C型凝集素受体(CLRs)参与了几种自身免疫性疾病的发生,但是CLRs在VKH发病中的作用尚不清楚。目的:探讨CLRs基因多态性和VKH综合征的相关性研究。方法:本研究共招募了380名VKH患者和747名健康人。用Mass ARRAY飞行质谱和PCR-RFLP酶切分型技术对CLRs家族13个基因的14个SNP进行基因分型。两组间基因型和等位基因的频率比较用卡方检验统计分析。结果:本研究中VKH患者和健康对照组的13个基因的14个SNP的基因型频率均没有偏离哈迪温伯格平衡(p0.05),13个基因的14个SNP的等位基因和基因型频率在VKH患者和健康对照两组间比较没有统计学差异(p0.05)。结论:我们的研究证实了CLRs和中国汉族人群中VKH的易感性无关。
【学位单位】：重庆医科大学
【学位级别】：博士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R597.9;R773.9
【部分图文】：

基因型

图 1.1. MBL2/rs1800450 基因型对 PBMCs 表达 MBL2 的影响e 1. The influence of MBL2/rs1800450 genotypes on the expression of MBL2 by e shown as mean ± SD. *P = 0.019 (GG/AG = 12).

基因型

图 1.2 KLRC4/rs2617170 基因型对 PBMCs 表达 KLRC4 的影响ure 1.2 The influence of KLRC4/rs2617170 genotypes on the expression of KLRPBMCs.re shown as mean ± SD. **P < 0.001 (CC = 13, CT = 11, TT = 10).

细胞因子,细胞分泌

图 4. KLRC4 不同基因型对细胞因子产量的影响Figure 4. Effect of KLRC4 genotype on cytokine production by LPS stimulated PBMCs fromhealthy genotyped individuals.IL-8 (a), IL-10 (b), IL-1β (c), IFN-γ (d), IL-6 (e) and TNF-α (f) were measured by ELISA in thcell culture supernatants. Data are expressed as the mean ± SD (CC = 10, CT = 10, TT = 8).a. KLRC4/rs2617170 不同基因型对 LPS 刺激的 PBMC 细胞分泌 IL-8 的影响。b. KLRC4/rs2617170 不同基因型对 LPS 刺激的 PBMC 细胞分泌 IL-10 的影响。.c. KLRC4/rs2617170 不同基因型对 LPS 刺激的 PBMC 细胞分泌 IL-1β的影响。d. KLRC4/rs2617170 不同基因型对 LPS 刺激的 PBMC 细胞分泌 IFN-γ的影响。e. KLRC4/rs2617170 不同基因型对 LPS 刺激的 PBMC 细胞分泌 IL-6 的影响。f. KLRC4/rs2617170 不同基因型对 LPS 刺激的 PBMC 细胞分泌 TNF-α的影响。3 讨论

【参考文献】