几丁糖抑制甲状腺相关性眼病眼眶成纤维细胞炎症因子和脂肪生成的作用及机制研究

发布时间：2020-10-21 14:20

　　 目的几丁糖是作用很广的天然提取产物,临床适应症主要为防治外科术后组织粘连,在眼科被用于抑制视网膜炎症等研究。甲状腺相关性眼病(GO)病理表现为眼眶炎症和眶周软组织大量重构,目前几丁糖在甲状腺相关性眼病中的作用,尚不清楚。本课题选取GO眼眶成纤维细胞为研究对象,从眼眶成纤维细胞炎症因子及脂肪生成的角度探讨几丁糖在甲状腺相关性眼病中的作用及机制。方法原代培养GO眼眶成纤维细胞。通过CCK-8(Cell Counting Kit-8)、流式细胞仪检测凋亡及细胞周期来评价不同浓度几丁糖对眼眶成纤维细胞活性影响。通过IL-1β与几丁糖共培养眼眶成纤维细胞,用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测不同时间点细胞上清液中interleukin-6(IL-6)和prostaglandin E-2(PGE-2)蛋白水平。通过实时定量PCR(real-time PCR)和Western-Blot检测cyclooxygenase-2(COX-2)表达水平。Western-Blot检测JNK信号通路磷酸化水平。在脂肪诱导培养基中,对眼眶成纤维细胞进行脂肪细胞分化诱导,采用几丁糖进行干预处理。油红染色观察脂肪细胞生成情况,Western-Blot检测FABP-4,adiponectin,C/EBPα和PPAR-γ等蛋白表达水平和AKT信号通路磷酸化水平。结果0.1mg/ml和0.01mg/ml几丁糖对眼眶成纤维细胞活性无影响。IL-1β可诱导眼眶成纤维细胞IL-6和PGE-2蛋白生成增加。几丁糖可明显抑制IL-1β诱导的IL-6和PGE-2蛋白产生,降低COX-2mRNA和蛋白表达。JNK抑制剂可减少IL-6和PGE-2蛋白产生。几丁糖可抑制JNK信号通路磷酸化。油红染色表明几丁糖可明显抑制眼眶成纤维细胞向脂肪细胞分化,减少脂肪细胞生成,同时抑制FABP-4,adiponectin,C/EBPα和PPAR-γ等蛋白表达水平,降低AKT磷酸化水平。结论几丁糖可明显抑制眼眶成纤维细胞炎症因子和脂肪生成,其机制可能分别与降低JNK和AKT磷酸化水平有关。
【学位单位】：重庆医科大学
【学位级别】：博士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R581;R771.3
【文章目录】：
符号说明
中文摘要
英文摘要
前言
    参考文献
第一部分 甲状腺相关性眼病眼眶成纤维细胞原代培养
    前言
    1 材料和方法
    2 结果
    3 结论
    4 讨论
    参考文献
    附图
第二部分 几丁糖对眼眶成纤维细胞活性影响
    前言
    1 材料和方法
    2 统计学方法
    3 结果
    4 结论
    5 讨论
    参考文献
    附图
第三部分 几丁糖抑制IL-1β诱导眼眶成纤维细胞炎症因子的作用及机制研究
    前言
    1 材料和方法
    2 统计学方法
    3 结果
    4 结论
    5 讨论
    参考文献
    附图
第四部分 几丁糖抑制眼眶成纤维细胞脂肪生成的作用及机制研究
    前言
    1 材料和方法
    2 统计学方法
    3 结果
    4 结论
    5 讨论
    参考文献
    附图
全文总结
文献综述
    参考文献
致谢
攻读博士学位期间发表的学术论文、参研项目、会议交流情况

【参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 王浩;李玉珍;魏锐利;;IGF-1R和TSHR在甲状腺相关眼病免疫机制中的作用[J];中国实用眼科杂志;2014年04期

2 Yan Lu;Nan Zhou;Xiao Huang;Jin-Wei Cheng;Feng-Qian Li;Rui-Li Wei;Ji-Ping Cai;;Effect of intravitreal injection of bevacizumab-chitosan nanoparticles on retina of diabetic rats[J];International Journal of Ophthalmology(English Edition);2014年01期

3 任明玉;赵红;李静;;壳聚糖膜防治眼眶损伤后的软组织粘连[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年47期

4 陈燕;邢玉鉴;吴乾腾;;医用几丁糖预防手术后肠粘连的临床应用[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年03期

5 陈威;吴清平;张菊梅;吴慧清;;壳聚糖抑菌机制的初步研究[J];微生物学报;2008年02期

6 夏平光;侯春林;王万宏;;几丁糖抑制人成纤维细胞增殖的实验研究[J];中国修复重建外科杂志;2007年08期

7 夏平光;侯春林;;几丁糖诱导人成纤维细胞凋亡的实验研究[J];解放军医学杂志;2007年03期

8 韦萍;王爱勤;雷迅文;曹志新;李晓林;汪琴;;丁酰化壳聚糖膜对增殖细胞核抗原在兔眼滤过手术后成纤维细胞中的表达[J];中国医学科学院学报;2006年06期

9 杨红;向艳;张晓农;;几丁糖防治结膜瘢痕与睑球粘连的实验研究[J];中华眼科杂志;2006年04期

10 郭晟;魏锐利;王文斌;蒋丽霞;金玲;;壳聚糖预防兔眼眶手术术后组织粘连[J];眼科新进展;2006年03期

本文编号：2850231