Calreticulin诱导鼻咽癌CNE2细胞EMT相关信号通路研究

发布时间：2020-12-17 22:14

　　[目的]:本课题组前期发现钙网蛋白（Calreticulin,CRT）在鼻咽癌组织中高表达,通过诱导鼻咽癌CNE2细胞发生上皮间质转化（Epithelial-mesenchymal transition,EMT）促进其迁移侵袭。本文旨在探究CRT诱导鼻咽癌CNE2细胞EMT相关信号通路,及其促迁移侵袭的分子机制。[方法]:（1）采用Ensembl在线生物信息学软件预测NRP1的启动子区域序列,然后通过Jaspar软件预测转录因子结合位点,分析TGF-β/Smads信号通路中调控神经纤毛蛋白1（Neuropilin-1,NRP1）表达最佳转录因子。（2）将Si-CRT瞬时转染鼻咽癌细胞CNE2细胞（设阴性对照Si-NControl）,运用Western blot检测CRT低表达后细胞中SMAD3与其磷酸化、NRP1表达水平。（3）利用SMAD3特异性磷酸化抑制剂SIS3处理CNE2细胞,Western blot检测抑制SMAD3蛋白磷酸化后CRT与NRP1表达情况。（4）通过Western blot检测CNE2细胞中CRT低表达以及抑制SMAD3磷酸化后EMT相关蛋白E-cadherin... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

免疫细胞化学染色检测CNE2中NRP1的表达（SP法）

图 3.2 荧光显微镜下观察 CEN2 细胞转染效率A 为转染后白光下观察结果（40 倍），B 为转染后 RFP 荧光通道下观察结果（40 倍）空白 NC si-CRTCRTβ-actin

Westernblot检测转染后CEN2细胞中CRT蛋白的表达与空白组和NControl组相比，P=0.000

【参考文献】：
期刊论文
[1]NRP-1基因在鼻咽癌组织中的表达及对血管新生、细胞增殖及侵袭力的影响[J]. 王正清,燕晓东,张亚芳.  临床合理用药杂志. 2017(23)
[2]A new prognostic histopathologic classification of nasopharyngeal carcinoma[J]. Hai?Yun Wang,Yih?Leong Chang,Ka?Fai To,Jacqueline S.G.Hwang,Hai?Qiang Mai,Yan?Fen Feng,Ellen T.Chang,Chen?Ping Wang,Michael Koon Ming Kam,Shie?Lee Cheah,Ming Lee,Li Gao,Hui?Zhong Zhang,Jie?Hua He,Hao Jiang,Pei?Qing Ma,Xiao?Dong Zhu,Liang Zeng,Chun?Yan Chen,Gang Chen,Ma?Yan Huang,Sha Fu,Qiong Shao,An?Jia Han,Hai?Gang Li,Chun?Kui Shao,Pei?Yu Huang,Chao?Nan Qian,Tai?Xiang Lu,Jin?Tian Li,Weimin Ye,Ingemar Ernberg,Ho Keung Ng,Joseph T.S.Wee,Yi?Xin Zeng,Hans?Olov Adami,Anthony T.C.Chan,Jian?Yong Shao.  Chinese Journal of Cancer. 2016(06)
[3]NRP-1基因在鼻咽癌组织中的表达及靶向抑制基因表达对细胞功能的调节作用[J]. 马新明.  海南医学院学报. 2016(13)
[4]下调钙网蛋白表达对乳腺癌干细胞增殖、侵袭和凋亡的影响[J]. 李晓曦,孟琳,王天一,孙大鹏,仇凤启,马萍.  解剖科学进展. 2013(04)
[5]EB病毒LMP1促鼻咽上皮细胞增殖的蛋白分子鉴定[J]. 张志伟,张琼,刘洁琼,余艳辉,贺智敏.  中国病理生理杂志. 2010(02)

博士论文
[1]CXCR4和CD133共表达对II-III期结肠癌预后影响的分析[D]. 张念华.南方医科大学 2012

硕士论文
[1]钙网蛋白对鼻咽癌细胞EMT的影响[D]. 金明.南华大学 2016
[2]富集结肠癌肿瘤干细胞的球细胞与上皮间质转化之间关系的实验研究[D]. 岳中屹.华中科技大学 2013



本文编号：2922795