分化抑制因子1及其信号通路在中耳胆脂瘤骨质破坏中的作用

发布时间：2017-08-27 00:13

  本文关键词：分化抑制因子1及其信号通路在中耳胆脂瘤骨质破坏中的作用

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【摘要】：研究目的：探讨分化抑制因子1（inhibitors of differentiation1,Id1）及其信号通路在中耳胆脂瘤骨质破坏中的作用。 研究方法：（1）收集胆脂瘤患者的31例胆脂瘤标本及14例外耳道正常皮肤标本，以免疫组化技术，分析胆脂瘤临床标本和外耳道正常皮肤标本组织蛋白酶K(CathepsinK,CTSK)表达情况。（2）以免疫印迹法测量临床胆脂瘤标本中NFATc1、c-Fos、CathepsinK、TRAP、OSCAR等蛋白表达情况。（3）以Id1基因转染人角化细胞株Rhek-1A，，建立体外模型。应用细胞消化计数法观察Id1基因转染Rhek-1A细胞后增殖活性的变化。（4）实时定量PCR法观察转染后Id1、NF-κB、NFATc1、c-Fos、CathepsinK、TRAP、OSCAR等mRNA的变化。（5）蛋白印迹法观察转染后NF-κB、NFATc1、CathepsinK等表达的变化。 研究结果：（1）CathepsinK主要表达于胆脂瘤组织及外耳道皮肤组织上皮细胞浆。CathepsinK在胆脂瘤组织中阳性表达率为96.8%，明显高于其在外耳道正常皮肤组织中的阳性表达率50%（P0.01)。（2）临床胆脂瘤标本中NFATc1、c-Fos、CathepsinK、TRAP、OSCAR等蛋白均有不同程度表达。（3）Id1基因转染Rhek-1A细胞后增殖能力明显提高。（4）实时定量PCR观察到Id1、NF-κB、NFATc1、c-Fos、CathepsinK、TRAP、OSCAR在Rhek-Id1细胞的表达分别是Rhek-1A细胞的10.14倍、25.19倍、74.35倍、1.14倍、18.46倍、43.08倍、55.47倍。（5）免疫印迹法观察到Rhek-Id1细胞Id1、NFATc1、c-Fos、CathepsinK、TRAP、OSCAR的蛋白表达高于Rhek-1A细胞。 结论：Id1可以引起Rhek-1A细胞过度增生，激活NF-κB通路，上调细胞转录因子c-Fos和NFATc1,促进破骨效应分子TRAP、CTSK、OSCAR等的基因表达，可能参与胆脂瘤骨质破坏。
【关键词】：分化抑制因子1(Id1) 中耳胆脂瘤 骨质破坏
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R764.21
【目录】：

• 目录3-4
• 英文缩略词表4-5
• 中文摘要5-6
• ABSTRACT6-8
• 前言8-10
• 第一部分 临床胆脂瘤标本破骨相关信号分子及细胞因子表达情况10-19
• 第一节 免疫组化（IHC）检测组织蛋白酶 K 在中耳胆脂瘤上皮的表达10-15
• 1 材料10-11
• 2 实验方法11-12
• 3 结果12-15
• 第二节 蛋白印迹检测破骨相关信号分子及细胞因子在中耳胆脂瘤上皮的表达15-19
• 1 材料15-16
• 2 实验方法16-18
• 3 结果18-19
• 小结19
• 第二部分 分化抑制因子 1（Id1）及其信号通路在中耳胆脂瘤骨质破坏中的作用19-34
• 第一节 Id1 基因转染人角化细胞 RHEK-1A 后增殖活性改变19-21
• 1 材料19-20
• 2 实验方法20
• 3 结果20-21
• 第二节 实时荧光定量 PCR 检测 Id1 基因转染人角化细胞株 RHEK-1A 后破骨相关基因表达21-29
• 1 材料21-23
• 2 实验方法23-25
• 3 结果25-29
• 第三节 蛋白印迹检测 Id1 基因转染人角化细胞株 RHEK-1A 后破骨相关蛋白表达29-33
• 1 材料29-31
• 2 实验方法31-33
• 3 结果33
• 小结33-34
• 讨论34-39
• 结论39-40
• 参考文献40-44
• 致谢44-45
• 综述45-52
• 参考文献51-52

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前7条

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本文编号：743416