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SETD1A在喉鳞癌中的表达及临床意义

发布时间:2017-08-28 12:52

  本文关键词:SETD1A在喉鳞癌中的表达及临床意义


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【摘要】:目的:本研究通过检测喉鳞癌组织和癌旁组织中SETD1A的mRNA、蛋白的表达及组蛋白H3K4三甲基化(H3K4me3)水平,分析其蛋白表达与喉鳞癌患者临床病理参数间的关系及H3K4me3水平与SETD1A mRNA的相关性,探索SETD1A在喉鳞癌中的表达及临床意义。 方法:1.运用定量逆转录聚合酶联反应(qRT-PCR)方法检测43对样本喉鳞癌组织和癌旁组织中SETD1AmRNA表达水平的差异; 2.采用免疫组织化学(IHC)方法检测SETD1A蛋白在135例喉鳞癌组织中的表达情况,并采用χ2检验分析SETD1A蛋白表达与喉鳞癌患者临床病理参数间的关系; 3.提取43对样本喉鳞癌组织和癌旁组织中蛋白测定组蛋白H3K4me3水平,通过Pearson直线相关性分析H3K4me3相对水平与SETD1AmRNA目对表达量的相关性。 结果:1.qRT-PCR结果示SETD1A mRNA在喉鳞癌组织组、癌旁组织组中相对表达量的均值±标准差(x±SD)分别为0.668±0.131、0.519±0.136,两组间有显著差异(P0.001),即喉鳞癌组织组SETD1A mRNA高于癌旁组织组; 2.IHC结果示SETD1A蛋白在喉鳞癌组织中表达上调,135例喉鳞癌组织中128例呈阳性表达(94.8%),69例为低表达(51.1%)、66例为高表达(48.9%),在癌旁组织组、声带息肉组均为阴性表达; 3.结合喉鳞癌患者临床病理参数发现,SETD1A蛋白的表达与肿瘤原发部位(P=0.006)、T分期(P0.001)、N分期(P=0.009)、临床分期(P0.001)及病理分化程度(P=0.006)等密切相关;但与年龄、吸烟史、酗酒史等参数在统计学上无明显相关(P0.05); 4.喉鳞癌组织组、癌旁组织组中H3K4me3水平的均值±标准差(x±SD)分别为1.494±0.278(%)、0.29±0.077(%),两组间具有显著差异(P0.001),即喉鳞癌组织组中H3K4me3水平明显高于癌旁组织组; 5.样本中喉鳞癌组织相对于癌旁组织的H3K4me3水平与SETD1AmRNA相对表达量呈正相关性(r=0.605),且该线性回归关系具有统计学意义(回归系数的假设检验P0.001)。 结论 1.SETD1A的mRNA.蛋白及组蛋白H3K4me3水平在喉鳞癌组织组中显著高于癌旁组织组; 2.SETD1A蛋白在喉鳞癌患者中高表达与肿瘤原发部位、T分期、N分期、临床分期及病理分化程度等喉鳞癌患者临床病理参数相关,提示SETD1A在喉鳞癌的发生发展中可能发挥重要作用; 3.组蛋白H3K4me3相对水平与SETD1AmRNA相对表达量呈正相关性。
【关键词】:表观遗传学 组蛋白甲基化 SETD1A 喉鳞状细胞癌
【学位授予单位】:中南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R739.65
【目录】:
  • 摘要5-7
  • Abstract7-11
  • 英文~.略词11-12
  • 第一章 前言12-14
  • 第二章 材料与方法14-24
  • 2.1 仪器与设备14-16
  • 2.1.1 主要仪器14-15
  • 2.1.2 主要器材15
  • 2.1.3 主要试剂15-16
  • 2.2 研究对象16-17
  • 2.2.1 新鲜组织标本16-17
  • 2.2.2 石蜡组织标本17
  • 2.3 qRT-PCR方法及步骤17-20
  • 2.3.1 总RNA提取17-18
  • 2.3.2 引物设计与合成18
  • 2.3.3 SETD1A mRNA表达水平测定18-20
  • 2.4 IHC方法及步骤20-21
  • 2.4.1 免疫组织化学非生物素二步法20-21
  • 2.4.2 结果判定21
  • 2.5 组蛋白H3K4me3水平的测定方法及步骤21-23
  • 2.5.1 蛋白提取21
  • 2.5.2 蛋白浓度测定21-22
  • 2.5.3 组蛋白H3K4me3水平测定22-23
  • 2.6 统计学方法23-24
  • 第三章 结果24-29
  • 3.1 SETD1A mRNA表达水平24-25
  • 3.1.1 总RNA的质量鉴定24
  • 3.1.2 SETD1A mRNA在喉鳞癌组织与癌旁组织中的表达水平24-25
  • 3.2 SETD1A蛋白表达情况25-28
  • 3.2.1 SETD1A蛋白在喉鳞癌组织中的表达情况25-27
  • 3.2.2 SETD1A蛋白的表达与喉鳞癌患者临床病理参数的关系27-28
  • 3.3 组蛋白H3K4me3水平的测定28-29
  • 3.3.1 组蛋白H3K4me3在喉鳞癌组织与癌旁组织中的水平28
  • 3.3.2 组蛋白H3K4me3水平与SETD1A mRNA表达量间的相关性28-29
  • 第四章 讨论29-34
  • 4.1 SETD1A mRNA与蛋白在喉鳞癌组织与癌旁组织中的表达情况29-30
  • 4.2 SETD1A蛋白在喉鳞癌组织中高表达的临床意义30-31
  • 4.3 组蛋白H3K4me3在喉鳞癌组织与癌旁组织中的水平31-32
  • 4.4 组蛋白H3K4me3水平与SETD1A mRNA表达量的相关性32
  • 4.5 展望32-34
  • 第五章 结论34-35
  • 参考文献35-39
  • 综述39-56
  • 参考文献50-56
  • 致谢56

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 宫雁冰;钟鸣;王洁;;肿瘤细胞中的表观遗传编码紊乱[J];国际遗传学杂志;2006年02期

2 陈飞;李彬;王力红;梁传余;刘世喜;叶惠平;;喉及下咽部鳞癌颈淋巴结转移的相关研究[J];西部医学;2007年05期



本文编号:748025

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